金花清感颗粒通过促进中性粒细胞凋亡和抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路减轻急性肺损伤

民族药理学相关性：急性肺损伤（ALI）是流感病毒和冠状病毒等呼吸道病毒感染所致的致命并发症之一，具有较高的临床发病率和死亡率。金花清感颗粒（JHQG）已被中国食品药品监督管理局批准用于治疗H1N1流感和轻度或中度新型冠状病毒病（COVID-19），该药是基于麻杏石甘汤和银翘散开发的中药复方，这两种经典方剂在中国已用于呼吸道疾病数千年。然而，JHQG治疗感染性疾病的内在机制仍不清楚。研究目的：本研究通过观察JHQG对脂多糖（LPS）诱导的ALI小鼠中性粒细胞凋亡和关键信号通路的影响，探讨其抗炎机制。材料与方法：通过腹腔注射LPS（20 mg/kg）诱导脓毒症小鼠模型，观察JHQG对存活率的影响。为更好地进行药理学评价，小鼠接受气管内注射5 mg/kg LPS。评估肺组织病理学变化、肺湿干比、肺组织MPO活性以及BALF中总蛋白浓度、总细胞数、TNF-α、IL-1β、IL-6和MIP-2水平。通过Ly6G-APC/Annexin V-FITC染色检测中性粒细胞凋亡率。分别通过流式细胞术和共聚焦显微镜检测与凋亡相关的关键蛋白，包括caspase 3/7活性、Bcl-xL和Mcl-1。通过Western blot和免疫荧光分别分析TLR4受体及其下游信号。结果：在20 mg/kg LPS诱导的小鼠中，JHQG以6或12 g/kg/天的剂量治疗使存活率提高20%。在5 mg/kg LPS诱导的小鼠模型中，JHQG明显降低BALF中总蛋白浓度、肺湿干比和肺组织学损伤。它还减弱了MPO活性和肺组织中Ly6G染色阳性中性粒细胞的比例，并降低了BALF中MIP-2水平。JHQG抑制Mcl-1和Bcl-xL的表达并增强caspase-3/7活性，表明JHGQ部分通过内在线粒体凋亡途径促进中性粒细胞凋亡。在LPS诱导的小鼠中，JHQG治疗显著降低了TNF-α、IL-1β和IL-6的水平。此外，JHQG降低了TLR4、MyD88、p-p65的蛋白表达以及核p65的比例，表明JHQG治疗抑制了TLR4/MyD88/NF-κB通路。结论：JHQG通过促进中性粒细胞凋亡和抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路减轻肺部炎症，保护小鼠免受LPS诱导的ALI，提示JHQG可能是治疗ALI的有前景的药物。