抑制Kynu通过重塑色氨酸代谢恢复紧密连接完整性从而减轻胆管缺血性损伤

背景：胆管屏障功能破坏在缺血再灌注损伤中导致肝细胞毒性，常引起肝切除、移植和失血性休克的手术并发症。然而，其潜在机制尚不完全清楚。方法：在Pringle手法诱导的胆管损伤大鼠模型中，通过转录组和蛋白质组学分析色氨酸代谢；使用缺氧/复氧建立体外胆管细胞损伤模型。通过苏木精-伊红染色、Ki67/髓过氧化物酶免疫组化、透射电镜和TUNEL/CK19共染色评估胆管细胞损伤。通过测量跨上皮电阻、菊粉通透性和ZO-1/CK19共染色的共聚焦免疫荧光评估紧密连接完整性。使用RT-qPCR和Western blot定量基因表达，通过液相色谱-串联质谱分析代谢物。结果：观察到色氨酸代谢相关基因（Kynu、Haao、Kat1/Kat2）和代谢物的显著改变。持续Pringle手法导致3-羟基邻氨基苯甲酸和喹啉酸水平升高，黄尿酸水平降低。在体外，使用shRNA或抑制剂苄丝肼抑制Kynu可改善缺氧胆管上皮细胞的紧密连接损伤并减轻炎症损伤。在体内，缺血后阻断Kynu减少了胆管损伤、炎症和胆道屏障通透性。蛋白质组分析显示，Kynu抑制降低了3-HAA、AA和QA水平，同时增加了XA水平。值得注意的是，XA（而非AA或QA）处理在缺氧条件下恢复了细胞连接完整性并调节细胞因子表达，可能通过GluR2/CX50途径调节ZO1。至第7天，BSZ或XA给药降低了血清胆红素水平并减轻了胆管增生。结论：我们的研究结果表明，Kynu抑制通过重新编程失调的色氨酸代谢，特别是通过上调XA，减轻胆管缺血性损伤。这种调节可能通过GluR2/3/CX50-ZO1轴恢复紧密连接功能，从而维持血液-胆管屏障完整性。靶向Kynu代表了缺血性胆管损伤的一种有前景的治疗策略。