外源性Adropin给药对雄性大鼠下丘脑-垂体-睾丸轴的神经内分泌效应

Neuroendocrine effects of exogenous adropin administration on the hypothalamic pituitary testicular axis in male rats.

作者信息Ersen Eraslan, Ayhan Tanyeli, Mustafa Can Güler, Aslı Özbek Bilgin, Fazile Nur Ekinci Akdemir, Elif Polat, Selim Çomakli, Nezahat Kurt, Tuğba Bal Taştan
PMID41816746
发布时间2025-12-28
DOI10.55730/1300-0144.6164

实验完整度

包含动物模型(雄性Wistar大鼠)、体外激素检测(ELISA)、组织学检查和免疫组化,但缺乏功能验证(如精子参数)和机制验证(如受体信号)。

主要模型

雄性Wistar大鼠 下丘脑-垂体-睾丸轴

重点核对

Adropin剂量(4 μg/kg/day或40 μg/kg/day,腹腔注射) 处理时间(10天) 对照组别(对照组、假手术组) 激素检测时间点(第11天终末采血) 样本量(每组8只)

摘要

背景/目的:肥胖通过代谢功能障碍、氧化应激和下丘脑-垂体-睾丸(HPT)轴紊乱损害男性生育能力。Adropin(ADR)是一种在肥胖中循环水平降低的肽类激素,在代谢稳态中发挥新兴作用;然而,其在生殖内分泌调节中的作用仍不清楚。本研究在健康、非肥胖雄性大鼠中进行,旨在探讨外源性ADR给药对神经内分泌和睾丸的影响,重点关注循环生殖激素、下丘脑调节肽和睾丸抗氧化途径。材料与方法:将32只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、假手术组、低剂量ADR(4 μg/kg/天)和高剂量ADR(40 μg/kg/天)组,并处理10天。使用酶联免疫吸附测定(ELISA)测量循环促性腺激素、睾酮、抑制素B和激活素A。通过免疫组织化学评估下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)和kisspeptin表达,以及睾丸超氧化物歧化酶1(SOD1)定位。通过组织学检查大脑和睾丸形态。结果:高剂量ADR给药与下丘脑GnRH和kisspeptin表达增加相关,同时循环LH水平降低,而FSH浓度保持不变。与对照组相比,高剂量ADR组的睾酮和抑制素B水平较高,而激活素A水平较低。ADR给药还与增强的睾丸SOD1免疫反应性和剂量依赖性的体重降低相关。在脑皮层或睾丸组织中未观察到明显的组织病理学改变。结论:在健康、非肥胖的雄性大鼠中,外源性ADR给药与中枢神经内分泌标志物和睾丸抗氧化反应的变化相关,无明显组织病理学改变。这些发现并未证明生育能力的改善,但提示ADR可能参与连接代谢信号与生殖内分泌调节的途径。这些观察结果与肥胖相关的男性生殖功能障碍的潜在相关性仍属假设生成,需要在适当的疾病模型和功能性生殖研究中得到证实。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
外源性ADR给药对健康非肥胖雄性大鼠HPT轴、下丘脑调节肽和睾丸抗氧化途径的影响。
核心机制
ADR可能通过下丘脑kisspeptin-GnRH通路和睾丸抗氧化防御系统影响生殖内分泌,但受体机制未明。
主要证据
高剂量ADR组GnRH和kisspeptin免疫阳性增加,LH降低,睾酮和抑制素B升高,睾丸SOD1免疫阳性增强,无组织病理学改变。
研究意义
提示ADR可能参与代谢信号与生殖内分泌调节的整合,但作为针对肥胖相关生殖功能障碍的干预需进一步验证。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

动物分组与给药

评估不同剂量ADR对HPT轴的影响

32只雄性Wistar大鼠随机分为四组(n=8),腹腔注射ADR(4或40 μg/kg/天)或生理盐水,共10天。

2

血清激素检测

测量循环生殖激素水平

第11天断头取血,ELISA检测LH、FSH、睾酮、抑制素B和激活素A。

3

组织学检查

评估大脑皮层和睾丸组织形态

大脑皮层和睾丸组织经H&E染色,观察坏死、出血和变性。

4

免疫组化分析

评估下丘脑GnRH、kisspeptin和睾丸SOD1表达

使用特异性抗体进行免疫组化染色,并通过ImageJ定量平均光密度。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

验证激素水平
验证组织形态
验证蛋白表达
图像定量分析

产品清单

实验环节名称品牌货号
AdropinPhoenix Pharmaceuticals, Inc.--
LH ELISA试剂盒ElabscienceE-EL-R0026
FSH ELISA试剂盒ElabscienceE-EL-R0391
睾酮ELISA试剂盒ElabscienceE-EL-R0389
抑制素B ELISA试剂盒ElabscienceE-EL-R0521
激活素A ELISA试剂盒ElabscienceE-EL-R0001
酶标仪BioTEK Powerwave XS--
抗GnRH抗体Santa Cruz Biotechnologysc-8682
抗KiSS-1抗体Santa Cruz Biotechnologysc-101246
抗SOD1/Cu-Zn SOD抗体LSBioLS-B9346
链霉亲和素-生物素免疫酶标二抗系统Thermo Fisher ScientificTP-125-HL
光学显微镜Olympus BX51--
ImageJ软件----

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
动物给药
Adropin剂量(4或40 μg/kg/day)
阅读提示:Materials and methods 2.4
动物给药
给药途径(腹腔注射)
阅读提示:Materials and methods 2.4
动物给药
处理时间(10天)
阅读提示:Materials and methods 2.4
血清激素检测
采血时间(第11天)
阅读提示:Materials and methods 2.5
免疫组化
抗体稀释度(1:100)
阅读提示:Materials and methods 2.8
统计分析
各组样本量(n=8)
阅读提示:Materials and methods 2.9