产前脂多糖暴露通过调控缝隙连接蛋白43在子代大鼠中编程心脏纤维化

本研究探讨了缝隙连接蛋白43（Cx43）在介导产前炎症诱导的子代心脏纤维化中的作用，特别探索了其与自噬和DNA甲基化通路的动态调控。怀孕的Sprague-Dawley大鼠在妊娠第8、10和12天接受腹腔注射生理盐水（对照组）或脂多糖（LPS，0.79 mg/kg）。子代在产后第8周和第16周被处死。心肌组织进行组织病理学检查和分子分析。产前LPS暴露一致诱导子代显著的心脏纤维化。逆转录定量PCR显示，Cx43、LC3和DNA甲基转移酶1（DNMT1）的mRNA水平在8周时显著降低；然而，在16周时它们升高至超过对照组水平。Western blotting显示Cx43蛋白表达在两个年龄均持续受抑制，而LC3-II/I比值和DNMT1蛋白水平与双相mRNA趋势平行。使用新生大鼠心脏成纤维细胞进行LPS（10 µg/ml，24小时）处理的体外实验证实了Cx43和LC3的下调以及DNMT1的上调。使用靶向药理学干预来阐明这些调控关系。Cx43缝隙连接抑制剂甘氨酸脱氧胆酸（400 µM）与LPS共处理进一步抑制Cx43、LC3和DNMT1的表达。然而，Cx43激动剂全反式维甲酸（10 µM）共处理减弱了LPS诱导的DNMT1上调和LC3-II/I比值抑制。这些发现表明，Cx43的功能状态通过动态调控相互关联的自噬和DNA甲基化，将胎儿炎症刺激与出生后心脏纤维化发生关键性地联系起来，确立Cx43作为该致病网络中的上游调控节点。