系统层面的分子和免疫学证据确定Th17/Treg调节是苁蓉舒痉颗粒治疗帕金森病神经保护的关键机制

背景：帕金森病（PD）是一种进行性神经退行性疾病，神经炎症在其中起核心作用。苁蓉舒痉颗粒（CRSJ）是一种中药复方，在PD中显示出临床疗效，但其免疫调节机制仍不清楚。方法：我们研究了CRSJ对Th17/Treg免疫平衡的影响。采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）鉴定CRSJ的代表性化学成分。对代表性CRSJ化合物进行了表征，并通过分子对接和分子动力学模拟评估其结合亲和力。建立了MPTP诱导的PD小鼠模型，并用CRSJ治疗。通过流式细胞术、RNA测序、多重检测、免疫荧光和Western blotting评估行为结果、多巴胺能神经保护、免疫细胞亚群、转录组谱和细胞因子网络。结果：HPLC分析在CRSJ中鉴定出44种代表性化合物，涵盖多种与免疫调节、神经保护和抗氧化活性相关的化学类别。对CRSJ来源的血清成分的分子水平优先排序表明，芍药苷是关键的Th17/Treg平衡免疫调节候选物，在分子对接和分子动力学模拟中与RORγt、Foxp3和α-突触核蛋白表现出稳定的相互作用。在MPTP诱导的帕金森病小鼠模型中，CRSJ治疗剂量依赖性地改善运动性能，保护多巴胺能神经元，并减少纹状体α-突触核蛋白积累。转录组分析显示，CRSJ相关的变化朝向调节性免疫程序转变，特征是Th17相关信号的减弱和Treg相关通路的增强，并伴随TGF-β/SMAD3信号轴的持续调节。这些分子变化得到蛋白质水平验证的支持。CRSJ还通过促进小胶质细胞M1/M2极化并部分恢复失调的细胞因子和趋化因子谱，减轻神经炎症。整合免疫学分析表明，CRSJ恢复了Th17/Treg平衡并抑制CX3CL1/CX3CR1–Th17信号传导，共同支持CRSJ在PD中的免疫神经保护作用。结论：CRSJ通过恢复Th17/Treg稳态和抑制神经炎症通路发挥神经保护作用，支持其作为免疫调节疗法的潜力。