菠萝蛋白酶对大鼠肠缺血/再灌注损伤模型中促炎细胞因子和脂质过氧化的影响

The Influence of Bromelain Administration on Pro-Inflammatory Cytokines and Lipid Peroxidation in a Rat Model of Intestinal Ischemia/Reperfusion Injury.

作者信息Çağrı Gültekin, Serkan Sayiner, Şule Çetinel, Ahmet Özer Şehirli
PMID41640275
发布时间2026-03
DOI10.1002/vms3.70805

实验完整度

研究包含动物模型、生化检测、ELISA、组织病理学和统计分析,但缺乏多层级验证和机制研究。

主要模型

Wistar albino大鼠肠缺血/再灌注模型

重点核对

模型:大鼠肠系膜上动脉夹闭1小时再灌注1小时 分组:对照组、I/R组、I/R+bromelain组,每组6只 bromelain给药剂量和方式:40 mg/kg口服,缺血前30分钟 检测指标:血清肝肾功能指标(ALT、AST、ALP、LDH、BUN、肌酐)、TNF-α、IL-1β和MDA

摘要

背景:缺血再灌注损伤是多种临床操作后可能发生的严重问题。目的:本研究旨在探讨菠萝蛋白酶对大鼠肠缺血再灌注损伤引起的肠道损伤的影响。方法:将Wistar白化大鼠随机分为三组:对照组(CTR,n=6)、肠缺血再灌注组(I-IR,n=6)和肠缺血再灌注+菠萝蛋白酶组(I-IR+BRO,n=6)。I-IR+BRO组动物在缺血前30分钟口服菠萝蛋白酶(40 mg/kg)。I-IR和I-IR+BRO组通过夹闭肠系膜上动脉1小时实现缺血,然后开放夹闭1小时进行再灌注。再灌注结束后,处死动物并采集血液和组织样本。检测血清ALT、AST、ALP、LDH、BUN和肌酐以评估肝肾功能。测定血清和组织中TNF-α和IL-1β浓度以评估炎症反应。最后,通过测定MDA水平评估肠道的脂质过氧化。结果:I/R后ALT、AST、ALP、LDH、BUN和肌酐水平显著升高,但BRO治疗显著降低。与CTR组相比,两个IR组的血清和组织TNF-α、IL-1β浓度均升高。然而,与I-IR组相比,I-IR+BRO组这些值有所降低。与I-IR组相比,I-I/R+BRO组的组织病理学评分较低,但这些差异未达到统计学意义。结论:菠萝蛋白酶给药减轻了促炎细胞因子和肠组织遭受的有害影响。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
旨在评估bromelain对肠缺血再灌注损伤中促炎细胞因子、氧化应激和组织病理学变化的影响。
核心机制
bromelain通过抑制促炎细胞因子TNF-α和IL-1β的产生,减少脂质过氧化,从而减轻肠组织损伤。
主要证据
在Wistar大鼠肠I/R模型中,bromelain给药显著降低血清和组织的TNF-α、IL-1β水平,降低MDA水平,并改善组织病理学评分(尽管未达到统计显著)。
研究意义
研究提示bromelain可能作为兽医临床中减少I/R相关组织损伤的辅助治疗手段,但其全部疗效和机制需进一步研究。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

建立肠缺血/再灌注大鼠模型

模拟人类和小动物中的肠缺血再灌注损伤,以评估bromelain的保护作用。

将Wistar白化大鼠随机分为三组,通过夹闭肠系膜上动脉1小时再灌注1小时建立模型。

2

bromelain给药

评估bromelain对肠I/R损伤的潜在保护作用。

在缺血前30分钟给I-IR+BRO组大鼠口服bromelain(40 mg/kg)。

3

评估肝肾功能和炎症指标

评估I/R损伤对全身器官的影响以及bromelain的调节作用。

收集血清,测定ALP、ALT、AST、LDH、BUN和肌酐水平,以及血清和肠组织中TNF-α和IL-1β浓度。

4

检测肠道脂质过氧化

评估I/R诱导的氧化应激以及bromelain的影响。

制备肠组织匀浆,使用TBARS试剂盒测定MDA水平。

5

组织病理学评估

评估I/R损伤引起的形态学改变以及bromelain的组织保护作用。

取肠组织固定、包埋、切片、HE染色,在光镜下评估绒毛脱落、腺体增生和炎症细胞浸润。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

产品清单

实验环节名称品牌货号
Dounce组织研磨器Sigma-AldrichD8938
RIPA裂解液----
自动化分析仪MindrayBS240-Vet
大鼠TNF-α ELISA试剂盒Elabscience Biotechnology Inc.E-EL-R0019
大鼠IL-1β ELISA试剂盒Elabscience Biotechnology Inc.E-EL-R001
TBARS检测试剂盒Cayman Chemicals10009055
光学显微镜ZeissAxio Scope A1

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
动物模型建立
动物品系、体重、性别;缺血和再灌注时间;麻醉药物及剂量
阅读提示:见Materials and Methods 2.2和2.3
bromelain给药
给药剂量、途径和时间
阅读提示:见Materials and Methods 2.3
生化检测
检测仪器和试剂盒;样本处理条件(离心、存储)
阅读提示:见Materials and Methods 2.4
组织病理学
组织固定、切片厚度、染色方法、评分标准
阅读提示:见Materials and Methods 2.5