磷酸化模拟血栓海绵蛋白-1调节整合素β1-FAK信号通路和血管细胞功能

血栓海绵蛋白-1（TSP1）是一种多功能糖蛋白，在血管生成和血管重塑中起着关键作用。最近发现TSP1的Ser93是一个新的磷酸化位点，影响血管生成特性；然而，其潜在信号机制仍不清楚。在此，我们使用磷酸化模拟（TSP1S93D）和磷酸化缺失（TSP1S93A）突变体研究了Ser93磷酸化的功能影响。通过划痕实验和电阻抗传感器测量内皮细胞（EC）迁移。通过免疫印迹分析了关键通路（Akt、p38、ERK和FAK）的激活。通过ELISA定量TSP1分泌。通过使用内皮细胞的条件培养基进行Western blot检查对平滑肌细胞的下游效应。TSP1S93D的表达显著损害了内皮迁移和伤口闭合，这与FAK和paxillin磷酸化减少有关。在FAK信号通路上游，TSP1S93D显示出与整合素β1增强的结合并促进其聚集。相反，TSP1S93D刺激平滑肌细胞增殖、迁移、细胞骨架重塑，并向合成型、促炎状态转变，其特征是标志蛋白表达升高。总之，这些发现表明，TSP1S93D诱导的血管生成受损源于ECs中整合素β1-FAK通路的调节，抑制了内皮细胞运动性，同时促进平滑肌细胞激活，提示在早期血管重塑和炎症中的作用。