CD14+单核细胞将成为治疗骨质疏松症的新靶点：基于孟德尔随机化、临床分析和细胞实验验证

为了通过孟德尔随机化探讨单核细胞与骨质疏松症之间的因果关系，并通过后续实验加以验证。骨质疏松症和免疫细胞表型的数据来源于GWAS-Catalogue数据库。我们使用了多种孟德尔随机化方法，包括逆方差加权法、MR-Egger法、加权中位数法和简单中位数法，并辅以Cochran's Q、MR-Egger回归和留一法分析。临床样本分为健康组和骨质疏松组，采用流式细胞术分析两组的血液样本。进行体外细胞实验以研究si-CD14对单核细胞向破骨细胞分化的影响，采用蛋白质印迹、qPCR和TRAP染色技术。此外，我们通过蛋白质印迹、qPCR和茜素红染色评估了CD14+单核细胞对成骨细胞增殖和矿化的影响，并进一步研究了潜在机制。Cochran's Q结果表明孟德尔随机化结果存在异质性；因此，本研究的结论来自逆方差加权法。该方法加权结果显示，CD14+单核细胞计数与骨质疏松症之间存在正因果关系（β=0.096599，95% CI: 1.06246, 1.141806，p=1.46E−07）。此外，CD14+/CD16−单核细胞计数与骨质疏松症存在正因果关系（β=0.097927，95% CI: 1.065098, 1.142008，p=3.67E−08）。小鼠单核细胞在RANKL刺激下通过NF-kB通路被激活，导致其分化为破骨细胞；然而，si-CD14转染可以抑制这种分化。同样，糖皮质激素刺激可以抑制成骨细胞的增殖和矿化，而与CD14+单核细胞共培养会加剧糖皮质激素诱导的生物活性，这一过程受TGF-β/SMAD3通路调节。CD14+单核细胞或CD14+/CD16−单核细胞水平的升高被认为是骨质疏松症的危险因素。CD14在此过程中起关键作用。抑制单核细胞中CD14的表达可以通过抑制NF-kB通路阻止其分化为破骨细胞。此外，CD14+单核细胞与成骨细胞共培养已被证明可抑制TGF-β/SMAD3通路，从而抑制成骨细胞的增殖和矿化。