芍药苷通过调控H2O2损伤的PC12细胞中的凋亡和铁死亡改善脊髓损伤

背景：脊髓损伤（SCI）导致严重的神经功能障碍。目前的治疗策略仍然有限，恢复率低。氧化应激和铁死亡是继发性SCI的关键机制。芍药苷具有抗炎、抗氧化和神经保护作用；然而，其在SCI后调节凋亡和铁死亡中的作用仍不清楚。方法：通过用300 μM H₂O₂处理PC12细胞24小时建立体外SCI模型，然后用不同浓度的芍药苷进行干预。使用3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）法评估细胞活力，流式细胞术分析凋亡，免疫荧光检测脂质活性氧（ROS）水平，并使用酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒测量半胱氨酸（Cys）、谷胱甘肽（GSH）和谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）水平。采用Western blotting和逆转录定量聚合酶链反应（RT-qPCR）评估sirtuin 3（SIRT3）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）和BCL2相关X（Bax）的表达。此外，使用SIRT3特异性抑制剂3-TYP来验证SIRT3在芍药苷介导的保护中的作用。结果：芍药苷以剂量依赖性方式增加细胞活力；减少凋亡；抑制ROS积累；并恢复Cys、GSH和GPX4水平。芍药苷显著上调SIRT3 mRNA和蛋白表达。与3-TYP共处理减弱了芍药苷的保护作用，表明芍药苷的作用是通过激活SIRT3通路介导的。结论：芍药苷通过激活SIRT3信号通路并调节凋亡、氧化应激和铁死亡，对SCI诱导的损伤发挥显著的神经保护作用，为SCI治疗提供了新的潜在治疗靶点。