基于卟啉和锰的金属有机框架材料在水驱动下释放氧气和一氧化氮加速急性伤口愈合

Water-Driven Oxygen and Nitric Oxide Release from Porphyrin- and Mn-Based Metal-Organic Framework Enables Accelerated Acute Wound Healing.

作者信息Jieh-Neng Wang, Zih-Yu Tu, Wen-Jyun Wang, Wei-Peng Li, Wei-Ling Chen, Chung-Dann Kan
PMID40890044
发布时间2025-09-15
DOI10.1021/acsabm.5c00135

实验完整度

包含材料表征、体外细胞实验(MTT、划痕实验)、体内动物实验及组织学和血液生化分析,但体外实验主要基于单一细胞系,体内样本量较小,缺乏多层级独立验证。

主要模型

NIH/3T3成纤维细胞 C57BL/6小鼠急性伤口模型

重点核对

MOF纳米酶浓度为0.1 ppm Fe元素(体外实验) NO负载量:40 ppm Fe元素(制备) 给药剂量:10 μL纳米酶溶液(0.1 ppm Fe) 动物分组:对照组(PBS)、Mn-p-MOF组、Mn-p-MOF-NO组

摘要

医用气体,特别是氧气和一氧化氮(NO),由于其促进细胞增殖、血管生成和胶原沉积的作用,在临床应用中(尤其是伤口愈合)引起了极大的兴趣。然而,这些气体的使用受到诸如气体递送效率低和对正常组织潜在毒性等挑战的限制。在本研究中,我们阐明了一种使用基于卟啉的金属有机框架(MOF)的可行方法,这种独特的材料在双气体辅助伤口愈合方面显示出巨大的潜力。精心设计的MOF纳米棒含有催化活性的锰簇,能够在水暴露时自发分解水并随后产生氧气。该MOF包含铁螯合的卟啉,其不仅作为连接锰簇的配体,而且对NO气体表现出强亲和力,从而成功递送NO。负载的NO与MOF结合,可在水环境中释放。我们采用伤口愈合实验来评估负载NO的MOF的功效。在将MOF添加到成纤维细胞培养物中以供应O2和NO后,获得了显著加速的迁移和增殖,这为MOF在水驱动的双气体伤口护理治疗中的潜力提供了有力证据。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
基于卟啉和锰的MOF能否通过水驱动释放氧气和一氧化氮,从而加速伤口愈合?
核心机制
锰簇催化水分解产生氧气,铁-卟啉配体通过轴向配位结合NO并在水环境中释放,两种气体协同促进细胞迁移和增殖。
主要证据
体外划痕实验显示Mn-p-MOF-NO处理组在24小时内伤口完全闭合,且MTT实验显示细胞增殖显著增强;体内小鼠急性伤口模型显示Mn-p-MOF-NO组伤口闭合显著加快,组织学染色显示更完整的表皮修复和胶原沉积。
研究意义
该研究提供了一种基于MOF的水驱动双气体治疗策略,为伤口护理开发提供了新的方向。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

Mn-p-MOF纳米酶的合成与表征

合成具有催化活性的卟啉基MOF纳米棒并表征其结构和性质

通过混合醋酸锰、PVP和Fe-TCPP配体在DMF中反应合成Mn-p-MOF,并采用TEM、SEM、XRD、FTIR、UV-vis、XPS等手段进行表征。

2

NO负载

利用Fe-卟啉对NO的亲和力,将NO加载到MOF上

将Mn-p-MOF浸入含饱和NO的DMF溶液中,静置30分钟,离心洗涤获得Mn-p-MOF-NO。

3

氧气释放评价

验证Mn-p-MOF在水环境中催化产生氧气的能力

利用Ru(dpp)3Cl2荧光指示剂检测氧气生成,并比较有无H2O2条件下的氧产量;通过HIF-1α染色评估细胞内氧气产生。

4

NO释放评价

验证Mn-p-MOF-NO在水环境中的NO释放能力

采用Griess试剂法检测不同浓度Mn-p-MOF-NO释放的NO量,并通过DAF-2 DA荧光染色观察细胞内NO释放。

5

体外细胞毒性及伤口愈合实验

评估Mn-p-MOF和Mn-p-MOF-NO的生物相容性及促进细胞迁移和增殖的能力

通过MTT实验检测不同浓度纳米酶处理后的细胞活力;通过划痕实验观察0、2、24小时的伤口闭合情况。

6

体内急性伤口愈合评价

评估纳米酶在动物模型中的疗效和生物安全性

在C57BL/6小鼠背部创建1cm伤口,分别用PBS、Mn-p-MOF和Mn-p-MOF-NO处理,监测伤口闭合情况,并进行组织学和血液生化分析。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

产品清单

实验环节名称品牌货号
乙酸锰(III)二水合物Sigma-Aldrich--
三(4,7-二苯基-1,10-菲咯啉)氯化钌Sigma-Aldrich--
DAF-2 DA 荧光探针AAT Bioquest--
一氧化氮比色法检测试剂盒Elabscience--
乙酸SHOWA--
过氧化氢SHOWA--
F12K培养基----
内皮细胞生长补充物----
肝素----
青霉素/链霉素----
胎牛血清----
MTT试剂----
异氟烷----
HIF-1α抗体----

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
Mn-p-MOF合成
反应物浓度、反应时间、洗涤条件
阅读提示:Experimental Section 2.2
NO负载
NO饱和DMF浓度、负载时间、洗涤次数
阅读提示:Experimental Section 2.3
细胞实验
细胞系、培养条件、纳米酶浓度、孵育时间
阅读提示:Experimental Section 2.7, 2.8
动物实验
小鼠品系、年龄、伤口大小、给药体积、给药时间点
阅读提示:Experimental Section 2.10