多靶向氮杂香豆素-α-氰基肉桂酸酯杂合体通过微管蛋白和COX-2/VEGFR调节诱导G2/M期阻滞和细胞凋亡：体外机制基础与体内验证的见解

癌症仍然是一个重大的全球健康问题，其中乳腺癌是女性癌症相关死亡的主要原因之一。为了寻找多靶向抗癌药物，我们设计并合成了一系列新型的7-羟基氮杂香豆素-α-氰基肉桂酸酯杂合体，并通过全面的体外和体内研究评估了其治疗潜力。使用NMR、IR和元素分析确认了结构特征。在合成的化合物中，化合物7对MCF-7细胞（IC50 = 7.65 μM）和MDA-MB-231细胞（IC50 = 9.7 ± 1.15 μM）表现出最强的细胞毒活性，且对非致瘤性MCF-10A细胞具有显著选择性（IC50 = 52.02 μM），与参考药物多柔比星相比。机制性体外研究表明，化合物7诱导G2/M期阻滞和细胞凋亡，伴随促凋亡标志物（Bax、p53）的上调和Bcl-2的抑制。此外，化合物7显著抑制微管蛋白聚合，并在FRAP试验中表现出显著的抗氧化活性（IC50 = 144.71 μM），以及选择性COX-2抑制（IC50 = 1.264 μM，SI = 5.93）。使用艾氏腹水癌（EAC）模型的体内评估证实了其抗癌功效，在10 mg kg−1剂量下，活EAC细胞减少85.92%，肿瘤体积显著抑制。值得注意的是，化合物7通过恢复肝脏和肾脏生物标志物以及减少氧化应激和脂质过氧化，减轻了EAC诱导的肝肾毒性。此外，它显著下调了促炎（TNF-α）和血管生成（VEGFR-II）标志物，同时保持了正常的组织结构。总之，这些发现突出了化合物7作为一个有前途的多功能先导候选物，具有细胞毒、抗氧化、抗炎和抗血管生成活性，值得在癌症治疗中进一步开发。