M1巨噬细胞活化通过HIF-1α-HK2信号通路调控糖酵解促进糖尿病肾病

目的：巨噬细胞和糖酵解在糖尿病肾病（DKD）中发挥关键作用。然而，DKD中巨噬细胞糖酵解的调控及其机制仍不清楚。因此，本研究旨在探讨DKD中巨噬细胞糖酵解的调控机制。方法：采用RT-qPCR和免疫荧光检测DKD患者和小鼠中巨噬细胞极化。通过注射链脲佐菌素并给予高脂饮食诱导小鼠DKD。采用苏木精-伊红染色和Masson三色染色鉴定模型小鼠的病理改变并观察肾胶原纤维。使用商业试剂盒定量糖酵解代谢物水平。通过western blot分析HK2、PFK1、LDH、PK1和GLUT1的蛋白水平。采用高糖处理的Hkb-20细胞作为体外实验模型。THP-1细胞与Hkb-20细胞共培养。通过CCK8实验、流式细胞术和伤口愈合实验评估巨噬细胞极化对Hkb-20细胞功能的影响。使用ELISA试剂盒检测IL-6、IL-1β和TNF-α水平。采用免疫荧光染色检测缺氧诱导因子1（HIF-1α）与HK2的共定位。结果：我们发现DKD患者和小鼠中出现M1巨噬细胞极化和糖酵解活性增强。此外，我们证明M1巨噬细胞极化促进巨噬细胞和模型小鼠的糖酵解活性。此外，我们发现DKD病例和小鼠血清中HIF-1α和HK2明显升高。机制上，我们揭示HIF-1α通过激活HK2转录参与体外M1巨噬细胞极化和糖酵解活性。结论：我们证明M1巨噬细胞极化介导的糖酵解通过调节HIF-1α-HK2信号通路促进DKD。