微粉化纯化黄酮类成分(地奥司明)通过调节NF-kB/NO/cGMP和类固醇生成信号通路改善顺铂处理的雄性Wistar大鼠的性功能

Micronized purified flavonoid fraction (daflon) improves sexual function by modulating NF-kB /NO/cGMP and steroidogenic signaling in cisplatin-treated male Wistar rats.

作者信息Akhigbe Re, Akhigbe Tm, Adegbola Ca
PMID40688511
发布时间2025-07-10
DOI10.1016/j.bbrep.2025.102144

实验完整度

包含体内动物模型、生化检测(ELISA、酶活性、NO/cGMP)、组织学评估及性行为分析,且进行了功能与机制验证。

主要模型

雄性Albino Wistar大鼠 cisplatin诱导的性功能障碍大鼠模型 daflon干预模型

重点核对

大鼠品系:Albino Wistar,12周龄,体重146±0.5g,每组8只 药物剂量:daflon 100 mg/kg/day口服14天,顺铂7 mg/kg单次腹腔注射第8天 性行为评估:雌性大鼠诱情,配对观察30分钟,记录潜伏期和频率 生化指标:血清LH、FSH、睾酮,海绵体NO、cGMP、MDA、GSH、TNF-α、IL-1β、NF-kB,睾丸3β-HSD和17β-HSD活性 统计设计:单因素方差分析和Tukey事后检验,P≤0.05为显著

摘要

顺铂已知通过抑制睾酮水平诱导性功能障碍。它还上调核因子-κB(NF-kB),后者介导一氧化氮(NO)依赖的内皮功能障碍。本研究评估了地奥司明(一种含有地奥司明和橙皮苷的微粉化纯化黄酮类成分)对顺铂诱导的雄性性功能障碍中NF-kB/NO/环磷酸鸟苷(cGMP)和类固醇生成信号通路的影响。将32只雄性白化Wistar大鼠随机分为四组:载体处理组、地奥司明处理组、顺铂处理组和顺铂加地奥司明处理组。顺铂给药导致性功能受损,表现为骑跨、插入和射精潜伏期延长,以及交配动机和这些行为频率的降低。此外,顺铂降低了精子质量,并通过上调NF-kB和MDA及下调GSH(对维持内皮功能至关重要)而下调NO/cGMP水平。此外,顺铂抑制了血清黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)水平,并抑制了睾丸3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)和17β-羟基类固醇脱氢酶(17β-HSD)的活性,导致血清睾酮和多巴胺水平降低。地奥司明与顺铂联合给药导致NF-kB和MDA下调,GSH、NO和cGMP产生增加。地奥司明联合治疗还上调了LH、FSH、3β-HSD和17β-HSD,以及循环睾酮和多巴胺水平,这与性功能的改善相对应,表现为交配动机增强以及骑跨、插入和射精的潜伏期和频率改善。总之,地奥司明改善了顺铂处理大鼠的性功能。这涉及NF-kB的下调和海绵体NO/cGMP通路及睾丸类固醇生成信号的增强。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
daflon是否能改善顺铂诱导的雄性Wistar大鼠性功能障碍,其机制是否涉及NF-kB/NO/cGMP和类固醇生成信号通路?
核心机制
Daflon通过下调NF-kB,增强海绵体NO/cGMP通路,并上调类固醇生成酶(3β-HSD和17β-HSD)活性,从而恢复睾酮和多巴胺水平,改善性功能。
主要证据
实验显示daflon联合顺铂治疗显著降低NF-kB、MDA、TNF-α和IL-1β,增加GSH、NO、cGMP,提升LH、FSH、3β-HSD、17β-HSD、睾酮和多巴胺,并改善性行为参数和精子质量。
研究意义
作者提出daflon可能作为化疗患者(尤其是接受顺铂治疗的患者)的辅助治疗,但需进一步与标准药物比较的临床研究验证。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

动物分组与药物处理

建立顺铂诱导的性功能障碍模型,并评估daflon的干预效果

32只雄性Wistar大鼠随机分为4组:对照组(口服蒸馏水)、daflon组(100 mg/kg/day口服14天)、顺铂组(第8天腹腔注射7 mg/kg顺铂)、顺铂+daflon组(同时接受两种处理),评估体重变化。

2

性行为评估

检测顺铂对性功能的损害及daflon的改善作用

雄性与发情雌性大鼠1:1配对,在暗光下录像30分钟,评估交配动机评分,并记录骑跨、插入和射精的潜伏期和频率。

3

精子质量分析

评估顺铂对精子质量的影响及daflon的改善作用

从附睾收集精子悬液,分析精子计数、活力、存活率和异常形态(头部、中段、尾部缺陷)。

4

生化指标检测

检测血清激素、睾丸类固醇生成酶、海绵体氧化应激和炎症标志物

采用ELISA检测血清LH、FSH、睾酮,睾丸组织类固醇生成酶(3β-HSD和17β-HSD)活性,海绵体NO、cGMP、MDA、GSH、TNF-α、IL-1β、NF-kB水平,全脑多巴胺浓度。

5

睾丸组织学评估

观察顺铂对睾丸组织结构和Leydig细胞数量的影响及daflon的保护作用

睾丸固定于Bouin溶液,HE染色,光镜100x和400x观察;定量400x下20个间质空间中Leydig细胞数。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

验证模型或样本特征
验证细胞功能变化
验证分子表达变化
验证免疫效应
验证机制链路

产品清单

实验环节名称品牌货号
顺铂Naman Pharma Drugs--
地奥司明Servier Egypt Industries Limited--
睾酮ELISA试剂盒Bio-IntecoB-1-119,110,401
LH ELISA试剂盒Bio-IntecoB-1-119,120,604
FSH ELISA试剂盒Bio-IntecoB-1-119,112,203
多巴胺ELISA试剂盒AbnovaKA3838
雄激素受体ELISA试剂盒Biorbytorb438074
NF-kB ELISA试剂盒Elabscience BiotechnologyE-EL-R0674
TNF-α ELISA试剂盒Elabscience BiotechnologyE-EL-R2856
IL-1β ELISA试剂盒Elabscience BiotechnologyE-EL-R0012
cGMP ELISA试剂盒Elabscience BiotechnologyE-EL-0083
摄像机SonyDCR-SR68

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
动物模型
大鼠品系、年龄、体重、来源、饲养条件
阅读提示:见Materials and methods, Animal handling and experimental protocol
药物处理
daflon剂量、给药途径、持续时间;顺铂剂量、给药途径、时间点
阅读提示:见Materials and methods, Animal handling and experimental protocol
性行为评估
雌鼠发情诱导方案、配对比例、观察时间、评估指标
阅读提示:见Materials and methods, Sexual performance
生化检测
ELISA试剂盒品牌和货号、组织制备方法、检测波长
阅读提示:见Materials and methods, Biochemical assays
组织学评估
固定液、切片厚度、染色方法、放大倍数、Leydig细胞计数方法
阅读提示:见Materials and methods, Histological evaluation of the testis