一种新型2-氧代吡咯烷衍生物（LN-53）有效诱导人表皮角质形成细胞中Nrf-2信号通路激活

背景：皮肤是作为物理屏障的关键器官，保护身体免受病原体、过敏原和其他环境刺激物等有害物质的侵害。皮肤的慢性炎症以及人为影响可导致活性氧（ROS）过度产生。长期暴露于高水平的ROS和皮肤中抗氧化防御不足可能 contribute to 各种皮肤疾病的发生。核因子E2相关因子2（Nrf-2）信号通路通过促进抗氧化和解毒分子的产生，在增强抗氧化能力方面发挥关键作用。因此，Nrf-2通路的药理学激活可能有助于恢复氧化-抗氧化平衡，从而改善慢性皮肤疾病的治疗结果。本研究旨在探讨新型试剂（5-（（4-（4-（甲氧羰基）-2-氧代吡咯烷-1-基）苯基）氨基甲酰基）苯-1,2,3-三基三乙酸酯（LN-53），其基于我们团队先前开发的先导化合物SK-119的结构合成，对人表皮角质形成细胞（HEKs）中Nrf-2信号通路在mRNA和蛋白质水平的影响。方法：通过MTT、LDH、活/死细胞染色和caspase-3、-8、-9多重活性测定评估LN-53的细胞毒性。通过DCFH-DA染色评估细胞内ROS产生。通过使用人Nrf-2 siRNA瞬时转染沉默Nrf-2基因。通过qPCR评估Nrf-2及相关因子（血红素加氧酶-1（HO-1）和NAD（P）H脱氢酶：醌-1（NQO1））在mRNA水平，并通过Nrf-2激活测定和Western blot评估核和胞质部分的蛋白质水平。通过ELISA测定上清液中炎症细胞因子（IL-6和IL-8）的水平。结果：我们的结果表明，LN-53有效降低叔丁基过氧化氢（TBHP）引发的细胞内ROS产生，而不导致任何明显的细胞损伤。它促进Nrf-2的核转位，并在mRNA和蛋白质水平诱导Nrf-2、HO-1和NQO1的产生。LN-53介导的抗氧化基因表达的改变被Nrf-2敲低阻断。LN-53处理还抑制了TBHP暴露介导的IL-6和IL-8细胞因子释放。此外，发现新型化合物LN-53比母体化合物SK-119更稳定。结论：LN-53可通过促进Nrf-2核转位和抑制人表皮角质形成细胞中ROS产生，有效诱导抗氧化机制。这些数据可能表明LN-53有助于维持皮肤中的氧化还原平衡和稳态。