PRRSV GP4亚单位疫苗联合腺病毒异源初免-加强免疫策略在小鼠中诱导显著免疫应答

背景 猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）持续对全球养猪业造成广泛感染。目前，多种PRRSV候选疫苗处于临床前或临床试验阶段，每种疫苗各有优缺点。糖蛋白4（GP4）富含表位，能诱导机体产生中和抗体，在引发宿主免疫应答中发挥重要作用，是PRRSV疫苗开发的关键靶点。本研究通过原核和真核系统表达GP4，开发了一种结合亚单位疫苗和腺病毒载体疫苗的新型候选疫苗免疫策略。 结果 本研究对两种表达模式下的PRRSV GP4抗原结构进行了预测分析，结果显示具有良好的抗原性。成功构建了PRRSV GP4亚单位疫苗和基于腺病毒载体的疫苗。在小鼠模型免疫实验中，实施了异源初免-加强免疫策略：初次免疫使用GP4亚单位疫苗，加强免疫使用腺病毒载体疫苗。安全性评估显示，所有候选疫苗组均表现出良好的安全性。通过间接酶联免疫吸附试验和中和抗体检测，联合免疫组小鼠产生了更高水平的PRRSV特异性抗体，其中和抗体滴度显著高于单独免疫组。IgG亚型分析表明，蛋白组偏向Th2型免疫应答，而腺病毒组偏向Th1型免疫应答。联合免疫组血清中细胞因子IL-4、IFN-γ和TNF-α的分泌水平显著高于单独免疫组。此外，细胞免疫应答测试结果显示，联合免疫组显著增强了脾淋巴细胞增殖能力、IFN-γ分泌水平和细胞因子转录水平。这些发现表明，本研究开发的PRRSV GP4亚单位疫苗与腺病毒疫苗联合的异源初免-加强免疫策略成功诱导了小鼠强烈的体液和细胞免疫应答。 结论 本研究成功构建了PRRSV GP4亚单位和腺病毒载体疫苗，并通过异源初免-加强免疫策略在小鼠模型中诱导了高水平的PRRSV特异性中和抗体和细胞免疫应答。这些结果支持PRRSV疫苗的临床开发，为养猪业PRRSV防控策略带来了新的希望。