患者筛选与分组
确定符合标准的受试者并随机分配至益生菌或安慰剂组。
纳入中重度心衰(NYHA III-IV)行瓣膜置换术的患者,排除感染性心内膜炎、重大胃肠道手术史等,共52例分为Lac组和Placebo组。
Probiotic mitigates gut hypoperfusion-associated acute gastrointestinal injury in patients undergoing cardiopulmonary bypass: a randomized controlled trial.
随机对照试验、16S rRNA菌群分析、临床指标和预后评估
心脏瓣膜病患者 体外循环下心脏瓣膜置换术患者 患者粪便微生物组
益生菌补充剂量为每日6×10⁹ CFU,术前连续7天 益生菌包含Lactobacillus rhamnosus CMCC (B) P0028、P0029和Enterococcus faecium CMCC (B) P0030 主要结局为AGI发生率,依据ECICM AGI分级(≥2级) 随机化分组比例为1:1,采用计算机生成随机数和区组大小为10 16S rRNA测序分析肠道菌群组成
提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
确定符合标准的受试者并随机分配至益生菌或安慰剂组。
纳入中重度心衰(NYHA III-IV)行瓣膜置换术的患者,排除感染性心内膜炎、重大胃肠道手术史等,共52例分为Lac组和Placebo组。
验证术前补充益生菌对AGI预防的影响。
Lac组每日口服益生菌(Meitong®)6×10⁹ CFU,Placebo组口服麦芽糖安慰剂,持续7天,两组外观、味道、气味一致。
记录术后AGI发生情况及相关并发症。
采用ECICM AGI分级系统,术后前7天每日评估,最大分级≥2定义为AGI;记录机械通气时间、ICU住院时间、30天死亡率等。
评估肠道屏障功能、炎症反应和心肌损伤标志物的变化。
检测术后24h和72h的血样中的I-FABP2、CRP、IL-6、PCT、hs-TnI、NT-proBNP及肝肾功能指标。
明确益生菌对CPB患者肠道菌群组成的影响。
收集患者术前和术后粪便样本,进行16S rRNA V3-V4区测序,分析alpha多样性、beta多样性和差异菌群。
确定AGI的独立危险因素和保护因素。
单因素和多因素logistic回归分析临床变量与AGI发生的关系。
按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 益生菌干预 | 美通® | 江苏 | -- |
| I-FABP2检测 | 人I-FABP2 ELISA试剂盒 | Elabscience® | -- |
| PCR扩增 | Phusion®高保真PCR预混液 | New England Biolabs | -- |
| 文库构建 | Nextera XT索引试剂盒 | Illumina | -- |
| 测序 | NovaSeq6000 | Illumina | -- |
| 统计分析 | SPSS v.27.0 | -- | -- |
| R语言4.0.3 | -- | -- | |
| Prism 9.0 | -- | -- |
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 研究设计与随机化 | 随机分组方法、分配隐藏、盲法实施、样本量计算和实际入组人数 阅读提示:Methods:Study design and participants;Sample size |
| 干预方案 | 益生菌菌株、剂量(6×10⁹ CFU/天)、给药时间(术前7天)、安慰剂成分 阅读提示:Methods:Administration protocol |
| 结局指标定义 | AGI诊断标准(ECICM分级≥2)、次要结局(如ICU住院时间、院内感染)定义 阅读提示:Methods:Outcomes;Table 2 |
| 生物标志物检测 | I-FABP2、CRP、IL-6、PCT、hs-TnI、NT-proBNP的检测方法和试剂盒 阅读提示:Methods:Blood sample collection;Table 3 |
| 肠道菌群分析 | 粪便样本采集时机、DNA提取方法、16S rRNA引物和测序平台、生物信息学分析流程 阅读提示:Methods:Fecal sample collection;Gut microbiota analysis |