ELANE增强KEAP1蛋白稳定性并减少代谢功能障碍相关脂肪肝病中NRF2介导的铁死亡抑制

中性粒细胞弹性蛋白酶（Elane）在代谢相关脂肪性肝病（MAFLD）中表达上调，并具有促进疾病进展的能力。然而，Elane促进MAFLD发展的机制仍不清楚。铁死亡是一种铁依赖的非凋亡性细胞死亡形式，其特征在于铁诱导的脂质活性氧（ROS）积累，最近被认为是MAFLD发展的重要机制。在本研究中，我们使用Elane敲除（Elane-KO）和野生型（WT）小鼠及其原代小鼠肝细胞建立MAFLD体内和体外模型，以阐明Elane在肝细胞铁死亡和MAFLD发展中的作用。体内Elane-KO降低了高脂饮食（HFD）诱导的肝脏脂质过氧化水平和肝细胞死亡比例，上调了Nrf2和Gpx4的表达，并下调了Keap1的表达。重组Elane处理增加了肝细胞的脂质过氧化水平，增加了肝细胞的铁死亡率，上调了Keap1的表达，增强了Nrf2的泛素化，并在FFA诱导的MAFLD体外模型中下调了Nrf2和Gpx4的表达。然而，来自Elane-KO小鼠的原代肝细胞表现出相反的变化。此外，体外实验表明，Elane通过抑制Keap1蛋白的溶酶体降解，增强了Keap1的蛋白稳定性，从而增加了肝细胞中Keap1的表达。最后，体外Co-IP实验表明，Elane通过减弱P62与Keap1之间的结合，增加了Keap1的蛋白稳定性，并最终促进了MAFLD中肝细胞Nrf2泛素化和铁死亡。总之，我们的结果表明，Elane通过P62–Keap1–Nrf2–Gpx4轴促进MAFLD中肝细胞铁死亡。