Tithonia diversifolia 提取物的治疗潜力:调节链脲佐菌素诱导大鼠模型中的 IL-35、TNF-α 和血液学特征

Therapeutic potential of Tithonia diversifolia extract: Modulating IL-35, TNF-α, and hematology profile in streptozotocin-induced rat model.

作者信息Rondius Solfaine, Iwan Sahrial Hamid, Kurnia Desiandura
PMID39553780
发布时间2024-09
DOI10.5455/OVJ.2024.v14.i9.12

实验完整度

包含动物模型、血液生化与血液学检测、组织病理学分析,但缺乏空白对照组和机制验证。

主要模型

链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型

重点核对

大鼠品系和体重范围:雄性 Wistar 大鼠,200-250 g 糖尿病诱导剂量:单次腹腔注射 STZ 60 mg/kg TE 给药剂量和途径:口服 100 mg/kg 体重,持续 7 天 对照组设置:P0 对照组、P1 糖尿病组、P2 TE 治疗组、P3 槲皮素治疗组

摘要

背景:糖尿病 mellitus 是一个重要的全球健康问题,其患病率在全球范围内不断上升。目的:本研究旨在探讨 Tithonia diversifolia 提取物(TE)在降低链脲佐菌素(STZ)诱导的大鼠中白细胞介素-35(IL-35)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血液学特征方面的潜力。方法:共有 24 只大鼠分为四个治疗组:对照组(P0)、糖尿病诱导组(P1)、糖尿病诱导 + TE 组(P2)和糖尿病诱导 + 槲皮素组(P3)。通过单次注射 STZ(60 mg/kg)诱导糖尿病。TE 治疗口服给药 7 天。治疗后第 8 天,所有动物被安乐死,收集血液样本以评估炎症参数,包括 IL-35、TNF-α、GPx 和血液学特征。肾脏器官固定在 10% 缓冲中性福尔马林中进行组织病理学分析。数据采用方差分析(ANOVA)后 Duncan 检验(p < 0.05)进行分析。结果:血液学特征评估显示,P2 和 P3 组有显著改善,白细胞、血红蛋白、淋巴细胞和中性粒细胞降低,并且在 TE 治疗后糖尿病大鼠的 IL-35 和 TNF-α 水平显著降低。结论:TE 治疗在降低糖尿病大鼠的炎症标志物和恢复血液学参数方面表现出良好的效果,表明其作为糖尿病大鼠治疗剂的潜力。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
Tithonia diversifolia 提取物能否降低链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠的 IL-35、TNF-α 并改善血液学特征?
核心机制
TE 通过降低炎症细胞因子 IL-35 和 TNF-α 的水平,并抑制肾小球和肾小管的破坏,从而改善糖尿病大鼠的肾脏组织学改变。
主要证据
通过 STZ 诱导糖尿病大鼠模型,给予 TE 治疗后,ELISA 检测显示 IL-35 和 TNF-α 水平显著降低,血液学检测显示白细胞和淋巴细胞减少,肾脏 HE 染色显示组织损伤减轻。
研究意义
TE 作为潜在治疗药物在糖尿病大鼠中具有抗炎和恢复血液学参数的作用,可能为糖尿病治疗提供新的选择。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

糖尿病大鼠模型建立

建立链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠模型,以模拟糖尿病相关病理状态。

对 24 只雄性 Wistar 大鼠单次腹腔注射 STZ(60 mg/kg)诱导糖尿病,分为四组:对照组、糖尿病组、TE 治疗组和槲皮素治疗组。

2

提取物制备和给药

制备 T. diversifolia 提取物并给予治疗组,以评估其对糖尿病大鼠的影响。

收集新鲜 TD 植物,分离叶子,清洗,阴干,粉碎,用 70% 乙醇浸渍提取,提取物溶解于 0.1% CMC-Na 中。P2 组口服 TE 100 mg/kg 体重,P3 组口服槲皮素,持续 7 天。

3

血液学和生化指标检测

检测糖尿病大鼠经 TE 治疗后的血液学参数和炎症指标变化。

第 8 天安乐死大鼠,通过心脏穿刺收集血液,用全自动血液分析仪检测 RBC、Hb、PCV、WBC 等,用 ELISA 试剂盒检测 IL-35、TNF-α、GPx,用生化分析仪检测血糖、SGOT、SGPT。

4

肾脏组织病理学分析

评估 TE 治疗对糖尿病大鼠肾脏组织形态的影响。

取肾脏组织,固定在 10% 缓冲中性福尔马林,进行 HE 染色,显微镜检查肾小球和肾小管的形态变化。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

验证炎症因子表达变化
验证血液学指标
验证生化指标
组织病理学分析

产品清单

实验环节名称品牌货号
Diasys 诊断公司Diasys diagnostic GmbH--
大鼠特异性检测试剂盒Elabscience--
ELISA 试剂盒Bioassay Technology--
10% 缓冲中性福尔马林----
链脲佐菌素----
Tithonia diversifolia 提取物----
槲皮素----

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
动物模型建立
大鼠品系、性别、年龄、体重范围:雄性 Wistar 大鼠,2-3 个月,200-250 g;STZ 剂量:60 mg/kg 体重,单次腹腔注射。
阅读提示:Materials and Methods 部分
提取物制备和给药
TE 提取溶剂(70% 乙醇)、提取方法(浸渍)、TE 剂量(100 mg/kg 体重)、给药途径(口服)、给药时间(7 天)。
阅读提示:Materials and Methods 部分
血液学和生化检测
采血时间(第 8 天)、采血方法(心内穿刺)、抗凝管(EDTA )、检测指标(血糖、SGOT、SGPT、IL-35、TNF-α、GPx、血常规)。
阅读提示:Materials and Methods 部分
组织病理学分析
肾脏样本固定液(10% 缓冲中性福尔马林)、固定时间(48 小时)、染色方法(HE 染色)、观察倍数(100 倍)。
阅读提示:Materials and Methods 部分,Fig. 1 图注