Hsa-miR-214-3p通过下调B7H3抑制乳腺癌细胞生长并改善肿瘤免疫微环境

背景：免疫检查点抑制剂在实体瘤治疗中发挥重要作用，但目前靶向程序性死亡受体1（PD-1）、程序性死亡配体1（PD-L1）和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）的免疫检查点抑制剂在多种乳腺癌中临床疗效有限。B7H3已被广泛报道为一种免疫抑制分子，但其在乳腺癌患者中的免疫功能仍不清楚。方法：我们利用癌症基因组图谱计划（TCGA）和基因表达综合数据库（GEO）的数据分析了B7H3在乳腺癌样本中的表达。使用TarBase、miRTarBase和miRBase数据库筛选微小RNA。通过双荧光素酶报告基因实验研究了微小RNA hsa-miR-214-3p对B7H3的调控作用，并确定了相互作用的具体作用位点。使用Western blotting和定量PCR（qPCR）定量了人乳腺癌组织和癌旁正常组织中B7H3和hsa-miR-214-3p的表达水平。进行体外实验观察调控B7H3或hsa-miR-214-3p表达对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。此外，还检测了hsa-miR-214-3p对B7H3的调控作用。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和流式细胞术评估共培养的乳腺癌细胞和正常人外周血单个核细胞（PBMCs）对免疫细胞及相关细胞因子的影响。结果：在乳腺癌组织中，B7H3的表达水平与hsa-miR-214-3p的表达水平呈负相关，也与对乳腺癌细胞行为的调控作用相关。发现hsa-miR-214-3p通过下调B7H3抑制乳腺癌细胞生长。重要的是，我们的研究首次发现hsa-miR-214-3p在B7H3的3'UTR上有两个结合位点，两者独立发挥相似的作用。共培养实验揭示hsa-miR-214-3p阻碍B7H3对CD8+ T细胞和自然杀伤细胞的抑制功能。结论：本研究证实了B7H3的3'UTR上存在两个hsa-miR-214-3p结合位点，强化了hsa-miR-214-3p作为B7H3调控因子的作用。在乳腺癌中，hsa-miR-214-3p通过下调B7H3减少肿瘤细胞增殖并增强肿瘤免疫微环境。这些发现为乳腺癌的临床治疗提供了新的潜在靶点。