METTL3通过m6A依赖方式促进IRF4介导的浆细胞浸润从而加重系统性红斑狼疮肾损伤

背景 系统性红斑狼疮（SLE）是一种原因不明的自身免疫性疾病。N6-甲基腺苷（m6A）是最常见的mRNA修饰，参与干扰素产生和免疫细胞调节等多种免疫过程。然而，m6A在SLE免疫应答失调中的作用仍不清楚。 方法 收集SLE患者的外周血单个核细胞（PBMCs），通过甲基化RNA免疫沉淀测序（MeRIP-seq）比较m6A修饰谱。结合MeRIP-seq和RNA-Seq鉴定干扰素调节因子4（IRF4）。用qRT-PCR和WB检测IRF4和甲基转移酶3（METTL3）。随后探讨IRF4在SLE患者中的临床意义。通过流式细胞术检测雌性MRL/lpr小鼠B细胞亚群中IRF4的表达。用AAV9-METTL3-OE和/或AAV9-IRF4-sh处理的腺相关病毒（AAV）治疗雌性MRL/lpr小鼠。通过ELISA、病理染色和免疫荧光检测自身抗体水平和肾损伤。通过MeRIP-qPCR检测IRF4的m6A水平。通过RNA-seq探讨IRF4参与肾病理的下游效应分子，并用qRT-PCR验证。 结果 SLE患者的m6A甲基化特征明显异常，IRF4是受m6A修饰的上调基因。SLE患者和MRL/lpr小鼠肾脏中METTL3和IRF4表达升高。临床分析表明，IRF4水平高的SLE患者更易发生肾损伤。MRL/lpr小鼠浆细胞中IRF4表达尤其增加。METTL3诱导肾脏IRF4表达，MRL/lpr小鼠的血浆肌酐、ANA和尿ALB水平、IgG和C3沉积、肾损伤和浆细胞浸润加重。然而，IRF4缺失可部分减轻METTL3诱导的肾损伤。同时，METTL3过表达时IRF4的m6A水平升高。此外，敲低IRF4后Cxcl1、Bcl3和Fos mRNA的表达显著降低，这些基因主要参与TNF信号通路。 结论 我们的研究证实，上调的METTL3以m6A依赖方式促进IRF4表达，从而导致SLE中浆细胞浸润介导的肾损伤。这为m6A在SLE肾损伤中的作用提供了新的证据。