制备LCS-SeNPs
合成用于干预的低分子量壳聚糖硒纳米颗粒
用低分子量壳聚糖和亚硒酸钠制备LCS-SeNPs,通过冻干获得。
Chitosan-Stabilized Selenium Nanoparticles Alleviate High-Fat Diet-Induced Non-Alcoholic Fatty Liver Disease (NAFLD) by Modulating the Gut Barrier Function and Microbiota.
包含体外纳米颗粒制备、小鼠模型、组织学、血清指标、16S rRNA测序、代谢组学等多层级实验,并进行了功能验证和机制探讨。
高脂饮食诱导的C57BL/6J小鼠NAFLD模型
小鼠品系:C57BL/6J,雄性,5周龄,体重18±2g 分组:NCD、HFD、HFD+C、HFD+S,每组6只 LCS-SeNPs剂量:200mg/kg/天,灌胃给药 实验周期:14周 饮食:D12450J(4.3%脂肪)和D12492(35%脂肪)
提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
合成用于干预的低分子量壳聚糖硒纳米颗粒
用低分子量壳聚糖和亚硒酸钠制备LCS-SeNPs,通过冻干获得。
评估LCS-SeNPs对HFD诱导NAFLD的影响
将小鼠分为四组,饲喂NCD或HFD,并灌胃给予LCS或LCS-SeNPs,持续14周。
评估LCS-SeNPs对血脂、肝功能、肝脏和脂肪组织形态的影响
检测血清TG、TC、ALT、AST,并进行H&E和油红O染色。
评估LCS-SeNPs对肠道屏障的改善作用
通过AB-PAS染色、TEM观察杯状细胞和黏液,检测结肠紧密连接和黏蛋白基因表达及血清炎症指标。
分析LCS-SeNPs对肠道菌群组成的影响
对结肠内容物进行16S rRNA测序,分析菌群多样性和组成。
鉴定LCS-SeNPs影响的肠道代谢物和代谢通路
对结肠内容物进行非靶向代谢组学分析,筛选差异代谢物和富集通路。
按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 材料制备 | 低分子量壳聚糖 | Golden-Shell Pharmaceutical Co., Ltd. | -- |
| 乙酸 | Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd. | -- | |
| 血清分析 | 甘油三酯检测试剂盒 | Elabscience Biotechnology Co., Ltd. | E-BC-K261-M |
| 天冬氨酸氨基转移酶检测试剂盒 | Elabscience Biotechnology Co., Ltd. | E-BC-K236-M | |
| 总胆固醇检测试剂盒 | Elabscience Biotechnology Co., Ltd. | E-BC-K109-M | |
| 丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒 | Elabscience Biotechnology Co., Ltd. | E-BC-K235-M | |
| 脂多糖ELISA试剂盒 | CUSABIO BIOTECH CO., Ltd. | CSB-E13066m | |
| 二胺氧化酶ELISA试剂盒 | CUSABIO BIOTECH CO., Ltd. | CSB-E10090m | |
| 白细胞介素-6 ELISA试剂盒 | CUSABIO BIOTECH CO., Ltd. | CSB-E04639m | |
| 肿瘤坏死因子-α ELISA试剂盒 | CUSABIO BIOTECH CO., Ltd. | CSB-E04741m | |
| 组织学分析 | 显微镜 | Carl Zeiss AG | -- |
| 透射电子显微镜 | 环氧树脂812 | Servicebio | -- |
| HT7800透射电子显微镜 | Hitachi | -- | |
| RNA提取 | RNAeasy™动物RNA提取试剂盒 | Solarbio Science & Technology Co., Ltd. | -- |
| 实时荧光定量PCR | TB Green® Premix Ex Taq™ | Takara Biomedical Technology Co., Ltd. | -- |
| DNA提取 | 粪便基因组DNA提取试剂盒 | BioTeke | -- |
| DNA定量 | Qubit荧光定量仪 | Invitrogen | -- |
| PCR产物纯化 | AMPure XT磁珠 | Beckman Coulter Genomics | -- |
| 测序 | Illumina NovaSeq 6000测序平台 | Illumina | -- |
| Agilent 2100生物分析仪 | Agilent | -- | |
| 代谢组学 | Vanquish Flex超高效液相色谱系统 | Thermo Fisher Scientific | -- |
| ACQUITY UPLC T3色谱柱 | Waters | -- |
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 动物实验 | 小鼠品系、性别、年龄、体重、饲养环境、分组、剂量、给药方式、实验周期 阅读提示:参见2.3动物实验 |
| 血清分析 | 检测指标、试剂盒品牌和货号 阅读提示:参见2.4血清分析 |
| 组织学分析 | 染色方法、切片厚度、观察仪器 阅读提示:参见2.5组织学分析 |
| 肠道屏障功能评估 | AB-PAS染色、TEM样品制备、PCR引物序列 阅读提示:参见2.5, 2.7, 2.8 |
| 肠道菌群分析 | DNA提取、PCR引物、测序平台、数据分析参数 阅读提示:参见2.9, 2.10 |
| 代谢组学分析 | 色谱条件、质谱条件、筛选标准 阅读提示:参见2.11 |