一种新型自组装免疫刺激性siRNA联合凋亡促进与RIG-I激活在胶质瘤中的治疗效果

背景：当前的癌症治疗常常无法解决恶性肿瘤的复杂性，凸显了对创新治疗策略的迫切需求。RNA干扰技术能够特异性抑制基因表达，为对抗肿瘤提供了一种有前景的新方法。最近的研究发现了一种新型免疫刺激性小干扰RNA（siRNA），其具有独特序列（正义链5'-C；反义链3'-GGG），能够激活RIG-I/IRF3信号通路。这种激活诱导I型和III型干扰素的释放，从而产生有效的抗病毒免疫反应。然而，此类免疫刺激性siRNA在癌症治疗中尚未被探索。方法：IsiBCL-2是一种创新的免疫刺激性siRNA，旨在抑制B细胞淋巴瘤2（BCL-2）的水平，包含一个独特的基序（正义链5'-C；反义链3'-GGG）。胶质母细胞瘤细胞在体外用100 nM isiBCL-2处理48小时。评估了形态学变化、细胞活力（CCK-8实验）、增殖（集落形成实验）、迁移/侵袭（划痕实验和Transwell实验）、凋亡率、活性氧（ROS）和线粒体膜电位（MMP）。通过Western blotting和免疫荧光分析评估RIG-I和MHC-I分子水平，ELISA用于测量细胞因子（IFN-β和CXCL10）水平。建立了体内异种移植肿瘤模型，并通过瘤内注射证实了isiBCL-2的抗肿瘤效果。结果：IsiBCL-2对胶质母细胞瘤细胞生长具有显著抑制作用并诱导凋亡。BCL-2 mRNA水平显著降低67.52%。isiBCL-2处理后凋亡率约为51.96%，伴随MMP降低71.76%和ROS积累增加41.87%。Western blotting和免疫荧光分析显示isiBCL-2处理后RIG-I、MAVS和MHC-I水平升高。ELISA检测表明IFN-β和CXCL10水平显著增加。使用裸鼠的体内研究证实，isiBCL-2有效阻碍了胶质母细胞瘤的生长和进展。结论：本研究介绍了一种创新方法，通过将免疫刺激序列（正义链5'-C；反义链3'-GGG）整合到siRNA中，通过Hoogsteen碱基配对形成RNA二聚体，从而诱导先天信号传导。这种激活触发肿瘤细胞中的RIG-I信号通路，造成进一步损伤并诱导强效免疫反应。这种免疫刺激性siRNA的创新设计和应用为肿瘤免疫治疗提供了新的视角，对该领域具有重要意义。