样本采集
获取用于血清学检测的家畜血清样本。
在卡贾多县5个县和13个ward随机选择畜群和羊群,从颈静脉采集5-10毫升血液,无抗凝剂,分离血清并保存于-20°C。
Seroprevalence and spatial distribution of livestock brucellosis using three serological tests in Kajiado County, Kenya.
研究为横断面血清学调查,包含样本采集、三种血清学检测和统计分析,但缺乏功能验证或机制验证,证据层级单一。
牛血清样本(278份) 绵羊血清样本(256份) 山羊血清样本(248份)
样本来源:卡贾多县5个县和13个ward的牛群(34个)、绵羊群(25个)和山羊群(28个) 动物选择:未接种疫苗、多数为已产仔的雌性动物 检测方法:RBPT、i-ELISA和c-ELISA平行检测 样本量:牛278、绵羊256、山羊248,基于预期流行率计算
提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
获取用于血清学检测的家畜血清样本。
在卡贾多县5个县和13个ward随机选择畜群和羊群,从颈静脉采集5-10毫升血液,无抗凝剂,分离血清并保存于-20°C。
检测抗布鲁氏菌抗体,比较三种检测方法。
所有血清样本平行使用RBPT、i-ELISA和c-ELISA检测。RBPT按WOAH方法,绵羊和山羊使用改良法(75µl血清和25µl抗原)。i-ELISA和c-ELISA按试剂盒说明书操作。
估计个体、畜群、ward和县水平的血清流行率,并比较不同检测方法和风险因素。
使用Microsoft Excel录入数据,使用STATA和Epitools进行卡方检验和逻辑回归,计算kappa值评估检测方法一致性。
按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| c-ELISA | COMPELISA 160 和 140 试剂盒 | APHA Scientific | -- |
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 样本采集 | 采样时间(2020年12月至2021年)、采样地点(5个县,13个ward)、样本量(牛278,绵羊256,山羊248)、动物纳入标准(未接种疫苗,主要为已产仔雌性) 阅读提示:Methods sample size calculation 和 blood sample collection |
| RBPT | 血清和抗原体积(牛:25µl+25µl;绵羊/山羊:75µl+25µl)、反应时间(4分钟)、抗原供应商(CITA,西班牙) 阅读提示:Methods Rose Bengal plate test |
| i-ELISA | 试剂盒(Elabscience,第8版)、波长450nm、阳性判定标准(S/P% > 120%) 阅读提示:Methods indirect enzyme-linked immunosorbent assay |
| c-ELISA | 试剂盒(COMPELISA 160 & 140)、波长450nm、cut-off确定(60% conjugate control均值)、板上有效性条件(阴性对照均值>0.700,阳性对照<0.100) 阅读提示:Methods competitive enzyme-linked immunosorbent assay |