肯尼亚卡贾多县使用三种血清学检测的家畜布鲁氏菌病血清流行率和空间分布

Seroprevalence and spatial distribution of livestock brucellosis using three serological tests in Kajiado County, Kenya.

作者信息Mahacla O Odongo, Lilly C Bebora, James K Gathumbi, Gabriel O Aboge, Lillian W Waiboci, Joseph Erume
PMID38292705
发布时间2023-12
DOI10.5455/OVJ.2023.v13.i12.8

实验完整度

研究为横断面血清学调查,包含样本采集、三种血清学检测和统计分析,但缺乏功能验证或机制验证,证据层级单一。

主要模型

牛血清样本(278份) 绵羊血清样本(256份) 山羊血清样本(248份)

重点核对

样本来源:卡贾多县5个县和13个ward的牛群(34个)、绵羊群(25个)和山羊群(28个) 动物选择:未接种疫苗、多数为已产仔的雌性动物 检测方法:RBPT、i-ELISA和c-ELISA平行检测 样本量:牛278、绵羊256、山羊248,基于预期流行率计算

摘要

背景:布鲁氏菌病是一种严重的人畜共患感染,对畜牧业和人类健康具有全球性的社会经济影响。在肯尼亚,布鲁氏菌病呈地方性流行,但由于监测薄弱或零散,有关该病真正负担的信息有限。卡贾多县动物布鲁氏菌病的真实负担和传播情况尚不清楚。目的:本研究旨在确定卡贾多县家畜布鲁氏菌病当前的血清流行率和空间分布,并比较三种血清学检测方法,即虎红平板凝集试验(RBPT)、间接酶联免疫吸附试验(i-ELISA)和竞争性ELISA(c-ELISA)在检测血清阳性动物方面的效果。方法:在5个县和13个 ward 进行了一项横断面研究,共采集782份未接种疫苗的牛(n = 278;34个畜群)、绵羊(n = 256;25个羊群)和山羊(n = 248;28个羊群)血清样本,平行使用RBPT、i-ELISA和c-ELISA检测抗布鲁氏菌抗体。结果:总体动物血清流行率为6.91%(54/782);牛、绵羊和山羊分别为18.35%(51/278)、0.78%(2/256)和0.4%(1/248)。牛的血清流行率在RBPT、i-ELISA和c-ELISA中分别为2.2%(6/278)、14.4%(40/278)和4.7%(13/278);而绵羊(0.78%;2/256)和山羊(0.4%;1/248)仅在c-ELISA中呈阳性。牛群血清阳性率为67.65%(23/34),而绵羊和山羊群血清阳性率分别为8%(2/25)和3.6%(1/28)。结论:研究结果表明,卡贾多县牛布鲁氏菌病血清流行率中等,而绵羊和山羊较低。间接ELISA在检测牛血清阳性动物方面优于c-ELISA和RBPT,而c-ELISA在检测绵羊和山羊血清阳性方面优于RBPT和i-ELISA。这些结果将为布鲁氏菌感染的进一步研究提供基线数据,并为制定卡贾多县布鲁氏菌病控制策略奠定起点。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
确定卡贾多县家畜布鲁氏菌病的当前血清流行率和空间分布,并比较RBPT、i-ELISA和c-ELISA在检测血清阳性动物方面的表现。
核心机制
文中未明确说明。
主要证据
使用RBPT、i-ELISA和c-ELISA平行检测782份血清样本,结果显示牛、绵羊和山羊的血清流行率分别为18.35%、0.78%和0.4%;牛群血清阳性率为67.65%。
研究意义
研究结果为卡贾多县布鲁氏菌感染的进一步研究提供了基线数据,并为制定布鲁氏菌病控制策略提供了起点。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

样本采集

获取用于血清学检测的家畜血清样本。

在卡贾多县5个县和13个ward随机选择畜群和羊群,从颈静脉采集5-10毫升血液,无抗凝剂,分离血清并保存于-20°C。

2

血清学检测

检测抗布鲁氏菌抗体,比较三种检测方法。

所有血清样本平行使用RBPT、i-ELISA和c-ELISA检测。RBPT按WOAH方法,绵羊和山羊使用改良法(75µl血清和25µl抗原)。i-ELISA和c-ELISA按试剂盒说明书操作。

3

统计分析

估计个体、畜群、ward和县水平的血清流行率,并比较不同检测方法和风险因素。

使用Microsoft Excel录入数据,使用STATA和Epitools进行卡方检验和逻辑回归,计算kappa值评估检测方法一致性。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

产品清单

实验环节名称品牌货号
COMPELISA 160 和 140 试剂盒APHA Scientific--

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
样本采集
采样时间(2020年12月至2021年)、采样地点(5个县,13个ward)、样本量(牛278,绵羊256,山羊248)、动物纳入标准(未接种疫苗,主要为已产仔雌性)
阅读提示:Methods sample size calculation 和 blood sample collection
RBPT
血清和抗原体积(牛:25µl+25µl;绵羊/山羊:75µl+25µl)、反应时间(4分钟)、抗原供应商(CITA,西班牙)
阅读提示:Methods Rose Bengal plate test
i-ELISA
试剂盒(Elabscience,第8版)、波长450nm、阳性判定标准(S/P% > 120%)
阅读提示:Methods indirect enzyme-linked immunosorbent assay
c-ELISA
试剂盒(COMPELISA 160 & 140)、波长450nm、cut-off确定(60% conjugate control均值)、板上有效性条件(阴性对照均值>0.700,阳性对照<0.100)
阅读提示:Methods competitive enzyme-linked immunosorbent assay