普兰戈斯(Prangos pabularia (L.))在乙醇诱导的大鼠胃溃疡中的抗溃疡作用机制

Mechanisms of anti-ulcer actions of Prangos pabularia (L.) in ethanol-induced gastric ulcer in rats.

作者信息Ahmed A J Jabbar, Ramzi A Mothana, Mahmood Ameen Abdulla, Fuad Othman Abdullah, Khaled Abdul-Aziz Ahmed, Rawaz Rizgar Hussen, Mohammed F Hawwal, Omer I Fantoukh, Sidgi Hasson
PMID37965491
发布时间2023-12
DOI10.1016/j.jsps.2023.101850

实验完整度

包含急性毒性试验、乙醇诱导胃溃疡模型、组织病理、免疫组化及生化检测,但缺乏分子机制如 Western blot 或基因水平验证。

主要模型

Sprague Dawley 大鼠乙醇诱导胃溃疡模型 大鼠急性毒性试验

重点核对

Sprague Dawley 大鼠,雄性,180–200g,7–8周龄 分组:正常对照(1% CMC)、溃疡对照(乙醇)、奥美拉唑(20 mg/kg)、REPP(250和500 mg/kg) 乙醇诱导:100%乙醇,5 mL/kg,口服 预处理后60分钟给予乙醇,再1小时后处死 检测指标:溃疡面积、胃液pH、胃壁黏液、SOD、CAT、PGE2、MDA、TNF-α、IL-6、IL-10

摘要

消化性溃疡病是最大的消化系统疾病,其发病率和复发率在所有国家均呈上升趋势。Prangos pabularia (L.) 已被充分记载为一种民间草药,用于治疗包括胃溃疡在内的多种疾病。因此,本研究旨在探讨 Prangos pabularia 根提取物(REPP)对乙醇介导的大鼠胃损伤的胃保护作用。将 Sprague Dawley 大鼠分为 5 组:A 组和 B 组为正常对照和溃疡对照大鼠,预给予 1% 羧甲基纤维素(CMC);C 组为参考组,给予 20 mg/kg 奥美拉唑;D 组和 E 组分别预补充 250 和 500 mg/kg 的 REPP。一小时后,A 组口服 1% CMC,B-E 组给予 100% 乙醇。测定所有胃的溃疡面积、胃酸度和胃壁黏液。检查胃组织匀浆的抗氧化剂和 MDA 含量。此外,通过组织病理学和免疫组织化学方法分析胃组织。急性毒性结果显示,暴露于 2 和 5 g/kg REPP 的大鼠未出现任何毒性效应或组织学变化。溃疡对照组出现广泛的胃黏膜损伤,胃液和胃 pH 降低。REPP 治疗显著减少了乙醇诱导的胃损伤,表现为胃黏液和胃壁糖蛋白增加(PAS 染色增强)、胃酸度降低、白细胞浸润减少、Bax 和 HSP 70 蛋白正向调节,从而降低溃疡面积。REPP 补充正向调节氧化应激(增加 SOD、CAT、PGE2,降低 MDA)和炎症细胞因子(降低血清 TNF-α、IL-6,增加 IL-10)水平。这些结果可作为支持民间使用 P. pabularia 作为氧化应激相关疾病(胃溃疡)药物疗法的科学证据。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
Prangos pabularia 根提取物(REPP)对乙醇诱导的大鼠胃溃疡是否具有保护作用及其可能机制。
核心机制
REPP 通过增强胃黏膜防御(增加黏液分泌)、调节氧化应激(提高SOD、CAT、PGE2,降低MDA)、抑制炎症(降低TNF-α、IL-6,提高IL-10)以及调节凋亡相关蛋白(上调HSP70,下调Bax)来发挥胃保护作用。
主要证据
在乙醇诱导的胃溃疡模型中,REPP治疗显著降低溃疡面积,改善胃液pH和黏液含量,组织学显示黏膜损伤减轻,免疫组化显示HSP70上调、Bax下调,生化检测显示抗氧化酶升高和炎症因子改善。
研究意义
研究结果为 P. pabularia 在民间用于治疗胃溃疡提供了科学证据,并提示其可能作为开发新型抗溃疡药物的天然来源。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

急性毒性试验

评估 REPP 在2和5 g/kg剂量下的安全性。

将大鼠分为三组,分别给予1% CMC、2 g/kg REPP和5 g/kg REPP,观察14天行为变化,并分析肝肾功能和组织学。

2

胃溃疡模型建立与分组处理

建立乙醇诱导的胃溃疡模型并评估REPP的预防效果。

大鼠分为5组,A组正常对照,B组溃疡对照,C组奥美拉唑,D组和E组REPP低和高剂量。预处理后1小时,除A组外均给予无水乙醇。

3

胃液参数与溃疡面积测定

量化 REPP 对胃液分泌、pH 和溃疡严重程度的影响。

收集胃液测定pH,称重胃壁黏液,用解剖显微镜测量溃疡面积并计算抑制率。

4

组织病理学与组织化学分析

评估 REPP 对胃黏膜组织结构和糖蛋白含量的影响。

胃组织固定、包埋、切片、染色(H&E 和 PAS),进行组织学观察和糖蛋白评估。

5

免疫组织化学检测凋亡相关蛋白

检测 REPP 对 HSP70 和 Bax 蛋白表达的影响。

用免疫组化方法检测胃组织中 HSP70 和 Bax 的表达并进行半定量分析。

6

抗氧化与炎症指标检测

评估 REPP 对氧化应激和炎症因子的调节作用。

制备胃组织匀浆,检测 SOD、CAT、PGE2、MDA,同时检测血清 TNF-α、IL-6、IL-10 水平。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

产品清单

实验环节名称品牌货号
奥美拉唑----
羧甲基纤维素----
SOD检测试剂盒Elab ScienceE-BC-K020-M
CAT检测试剂盒Elab ScienceE-AB-11036
PGE2检测试剂盒Elab ScienceE-EL-0034
MDA检测试剂盒Elab ScienceE-EL-0060
TNF-α ELISA试剂盒MerckRAB0479
IL-6 ELISA试剂盒MerckRAB0311
IL-10 ELISA试剂盒MerckRAB0246-1KT
组织处理仪Leica--
光学显微镜Leica--
匀浆器Sigma-Aldrich--
PAS染色试剂盒Sigma--
Image J软件----

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
动物准备
动物品系、性别、年龄、体重、来源、饲养条件
阅读提示:见2.2章节
急性毒性试验
给药剂量、给药途径、观察期、行为学观察、组织病理检查
阅读提示:见2.3章节及结果3.1
胃溃疡实验
分组、预处理药物及剂量、乙醇诱导剂量和途径、时间点
阅读提示:见2.4章节及表1
检测方法
试剂盒品牌和货号、检测方法、样本处理步骤
阅读提示:见2.4.1-2.4.8
统计分析
统计方法、显著性水平、数据表示
阅读提示:见2.5