Adipsin通过Csk依赖性信号机制减轻糖尿病心肌病中的心脏微血管损伤

背景：微血管并发症与糖尿病患者不良结局风险显著增加相关，包括冠状微血管损伤，表现为心脏微血管内皮细胞（CMECs）间粘附连接的破坏。然而，导致糖尿病冠状动脉微血管高通透性的具体机制仍不清楚。方法：通过脂肪组织特异性Adipsin过表达小鼠（AdipsinLSL/LSL-Cre）及其对照（AdipsinLSL/LSL）诱导实验性糖尿病。此外，培养的CMECs暴露于高糖/棕榈酸（HG + PA）处理以模拟糖尿病进行机制研究。结果：结果表明，Adipsin过表达显著降低心脏微血管通透性，保持冠状动脉微血管完整性，并增加冠状动脉微血管密度。Adipsin过表达还减轻了糖尿病小鼠的心脏功能障碍。E/A比值（心脏舒张功能指标）经Adipsin改善。Adipsin过表达延缓左心室不良重塑，增强LVEF，并改善心脏收缩功能。富含Adipsin的外泌体被CMECs摄取，抑制CMECs凋亡，并增加CMECs在HG + PA处理下的增殖。富含Adipsin的外泌体还加速伤口愈合，挽救细胞迁移缺陷，并促进对HG + PA刺激的管形成反应。此外，富含Adipsin的外泌体维持内皮细胞边界的粘附连接，并逆转HG + PA损伤破坏的内皮高通透性。机制上，Adipsin阻断HG + PA诱导的Src磷酸化（Tyr416）、VE-钙粘蛋白磷酸化（Tyr685和Tyr731）以及VE-钙粘蛋白内化，从而维持CMECs粘附连接完整性。LC-MS/MS分析和免疫共沉淀分析（Co-IP）揭示Csk是Adipsin的直接下游调节因子。Csk敲低增加Src磷酸化（Tyr416）和VE-钙粘蛋白磷酸化（Tyr685和Tyr731），同时消除Adipsin诱导的VE-钙粘蛋白内化抑制作用。此外，Csk敲低抵消了Adipsin诱导的体外内皮高通透性保护作用以及体内冠状动脉微血管内皮屏障完整性的保护作用。结论：总之，这些发现支持Adipsin在调节CMECs粘附连接完整性中的重要作用，揭示其作为治疗靶点对抗糖尿病冠状动脉微血管功能障碍的潜力。