人尿样中脑源性神经营养因子测量的开发与验证，作为非侵入性效应生物标志物

背景：脑源性神经营养因子（BDNF），一种主要在脑中表达的神经营养生长因子，已被提出作为潜在的效应生物标志物；即其值可能与包括神经损伤在内的多种疾病相关的可测量生物标志物。欧洲人类生物监测计划（HBM4EU）也认识到效应生物标志物是建立环境污染物暴露与人类健康之间联系的有用工具。尽管测量血清BDNF的方案已确立，但仍需验证其在尿液中的评估，尿液是一种非侵入性样本，可随时间轻松重复。本研究旨在开发、标准化并验证一种量化尿液样本中BDNF蛋白水平的方法，然后用于生物监测研究。方法：测试了不同的实验条件和非竞争性商业酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒，以确定最佳分析程序，尽量减少ELISA试剂盒的缺点。在试点研究中验证了微调方案，使用来自同一西班牙青少年男性（西班牙INMA-格拉纳达队列）的觉醒时（n=150）和睡前（n=106）尿液样本。结果：在0.6毫升尿液酸化提取（预浓缩）后获得最佳结果。Raybiotech的ELISA试剂盒获得最高重现性。青少年男性尿液BDNF浓度在先前报告范围内（早晨=0.047–6.801 ng/ml，夜间=0.047–7.404 ng/ml）。觉醒和睡前样本中的尿液BDNF水平不符合正态分布，且不相关。结论：所开发的方法具有良好的灵敏度和重现性。在尿液中有可靠的标记物可能有助于诊断和监测可能的疾病（和治疗）。需要进一步研究以将尿液BDNF应用于生物监测研究，以进一步阐明其有用性和对神经损伤的生物学意义。