达格列净对射血分数降低的心力衰竭患者心肌成纤维细胞的直接作用及其与LCZ696和螺内酯的相互作用

目的：SGLT2抑制剂（SGLT2i）在慢性心力衰竭伴射血分数降低（HFrEF）患者中显示出积极影响。然而，SGLT2i对心脏细胞的直接作用及其与HFrEF主要药物的联合如何影响心肌成纤维细胞的行为和信号通路仍不清楚。我们旨在确定达格列净单独及与沙库巴曲/缬沙坦（LCZ696）或螺内酯联合对HFrEF患者心肌成纤维细胞功能的影响。方法与结果：从HFrEF患者（n=5）分离的心肌成纤维细胞用达格列净（1 nM–1 μM）单独或与LCZ696（100 nM）或螺内酯（100 nM）联合处理。通过划痕实验测定迁移率。使用多重蛋白阵列分析心力衰竭（HF）标志物的表达和信号通路的激活。来自健康供体的商业化心脏成纤维细胞作为对照（n=4）。与对照相比，HFrEF成纤维细胞表现出更高的迁移率（P=0.0036），并增加HF标志物的表达[倍数变化（Log2）：COL1A1–1.3；IL-1β–1.9；IL-6–1.7；FN1–2.9（P<0.05）]。达格列净以剂量依赖性方式减缓HFrEF成纤维细胞的迁移速率，并显著降低IL-1β、IL-6、MMP3、MMP9、GAL3和FN1的表达。SGLT2i对对照成纤维细胞无影响。这些效应与AKT/GSK3和PYK2激酶以及信号转导与转录激活因子（STAT）磷酸化降低相关。达格列净+LCZ696联合进一步降低成纤维细胞迁移，但对SGLT2i抑制单独诱导的信号通路和生物标志物表达的调节无显著影响。相反，达格列净+螺内酯联合不改变成纤维细胞的迁移速率，但显著改变了SGLT2i对MMP9、GAL3和IL-1β表达的反应，与AKT/GSK3和ERK1/2激酶磷酸化增加相关。结论：SGLT2i、LCZ696和螺内酯通过激活不同的信号通路调节来自HFrEF患者的分离心肌成纤维细胞的功能。SGLT2i+LCZ696联合在迁移方面显示出叠加效应，而螺内酯则改变了SGLT2i激活的信号通路及其对心力衰竭生物标志物的有益作用。