非小细胞肺癌放射抵抗关键基因和功能通路鉴定

目的：为更好地理解放疗抵抗及其潜在机制。方法：我们建立了非小细胞肺癌（NSCLC）放射抵抗细胞系，随后进行微阵列分析。随后在放射抵抗细胞系与敏感细胞系之间筛选出529个差异表达基因（DEGs）。利用京都基因与基因组百科全书（KEGG）和基因本体论（GO）富集分析鉴定了上述DEGs的生物学功能和富集通路。基因集富集分析（GSEA）显示，与放射敏感组相比，放射抵抗组中富集最多的基因集涉及免疫应答改变，如TNF信号通路。通过STRING数据库进行蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络分析，然后通过Cytoscape软件筛选出五个枢纽基因（CXCL10、IFIH1、DDX58、CXCL11、RSAD2）。RT-PCR证实了上述枢纽基因的表达。ChIP-X富集分析显示STAT1可能是上述枢纽基因的转录因子。考虑到PD-L1在多种肿瘤中可被STAT1激活并最终导致免疫耗竭，RT-PCR和Western blot验证了PD-L1的表达水平。结果：筛选出五个枢纽基因（CXCL10、IFIH1、DDX58、CXCL11、RSAD2），并验证其在放射抵抗组中高表达，STAT1可能是上述枢纽基因的转录因子。我们的研究发现，放疗抵抗发生后PD-L1表达水平升高。结论：尽管放射抵抗后发生免疫系统激活，我们假设STAT1激活引起的PD-L1表达上调可能是放疗抵抗的机制之一。