Fagonia indica通过抗氧化和抗炎活性减轻铬诱导的小鼠肾毒性

Fagonia indica attenuates chromium-induced nephrotoxicity via antioxidant and anti-inflammatory activities in mice.

作者信息Abdullah Almilaibary, Eman A A Abdallah, Mohamed F El-Refaei
PMID36072257
期刊Heliyon
发布时间2022-08-27
DOI10.1016/j.heliyon.2022.e10373

实验完整度

包含动物模型、生化检测、组织学和免疫组化,但缺少细胞实验和机制验证。

主要模型

瑞士白化小鼠 小鼠肾组织

重点核对

小鼠品系:瑞士白化小鼠,雄性,体重26-28g 分组:5组,每组10只,包括对照组、F. indica组、Cr中毒组、Cr+盐水组、Cr+F. indica组 Cr给药:腹腔注射重铬酸钾15 mg/kg/b.wt,连续10天 F. indica给药:腹腔注射120 mg/kg/b.wt,连续12天 检测指标:SOD、GST、GSH-Px活性,血清BUN、肌酐、IL-6水平,肾脏组织学和caspase-3免疫组化

摘要

铬(Cr)是一种常见的环境污染物,具有广泛的毒性表现。Fagonia indica(F. indica)是一种具有抗炎特性和抗氧化活性的草药。本研究旨在评估F. indica(全株)在减轻Cr诱导的瑞士小鼠肾毒性中的保护作用。将瑞士白化小鼠分为五组(每组10只):I组(对照);II组(F. indica处理);III组(Cr中毒);IV组(Cr和盐水中毒);V组(Cr中毒并F. indica处理)。处死后采集血样进行生化检查。收集肾脏标本以检查抗氧化活性,并对所有组进行组织学和免疫组织化学研究。以15 mg/kg/b.wt剂量Cr中毒的小鼠与对照组相比,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平降低,随后血清IL-6水平升高。数据显示肾小管上皮细胞严重损伤,以及明显的充血和扩张小管中caspase-3的阳性、弥漫性和强表达。此外,数据显示III组血清尿素氮(BUN)和肌酐水平较I组升高。以120 mg/kg/b.wt剂量F. indica处理的V组显示抗氧化活性改善,IL-6水平降低,组织病理学紊乱减少,且血清BUN和肌酐水平较III组显著降低。这些变化可能归因于F. indica的抗氧化和抗炎作用。因此,我们的研究表明F. indica有效保护Cr诱导的肾毒性。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
Fagonia indica能否通过抗氧化和抗炎活性减轻铬诱导的肾毒性?
核心机制
F. indica通过增强抗氧化酶活性(SOD、GST、GSH-Px)和降低促炎细胞因子IL-6水平,减轻氧化应激和炎症,从而保护肾脏。
主要证据
小鼠模型中,F. indica处理显著逆转Cr导致的抗氧化酶降低、IL-6升高、BUN和肌酐升高,并减少肾脏病理损伤和caspase-3表达。
研究意义
研究表明F. indica可能作为一种有用的草药,用于监测氧化应激、改善肾脏生化参数和调节炎症,未来可能应用于治疗不同疾病。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

测定F. indica提取物的自由基清除活性

评估F. indica的体外抗氧化能力。

使用DPPH自由基清除实验,测定不同浓度F. indica提取物的清除活性,并与标准品BHT比较,计算IC50。

2

建立铬诱导的肾毒性小鼠模型

确定重铬酸钾诱导肾毒性的剂量和时间。

用不同剂量重铬酸钾(15、25、35 mg/kg/b.wt)腹腔注射小鼠,连续10天,根据肾小管损伤和死亡率选择诱导剂量。

3

实验分组及药物处理

评估F. indica对铬诱导肾毒性的保护作用。

将小鼠随机分为5组,分别给予对照、F. indica、重铬酸钾、重铬酸钾+盐水、重铬酸钾+F. indica处理,检测各项指标。

4

生化指标检测

评估肾脏功能和氧化应激状态。

检测肾组织匀浆中SOD、GST、GSH-Px活性,以及血清BUN、肌酐和IL-6水平。

5

组织病理学检查

评估肾脏组织损伤程度。

取肾脏切片,H&E染色,显微镜观察肾小管、肾小球和间质的变化。

6

免疫组化检测caspase-3表达

评估细胞凋亡情况。

使用抗caspase-3抗体进行免疫组化染色,评估肾组织中caspase-3的表达强度和分布。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

产品清单

实验环节名称品牌货号
蛋白酶抑制剂片RocheSKU
均质器HG-15DWiteg Labortechnik GmbH--
Spectro 24RS VIS分光光度计Labomed IncS.N.
比色法试剂盒(脲酶法)ElabscienceE-BC-K183-S
肌酐血清检测试剂盒Arbor AssaysKB02-H1
链霉亲和素-生物素免疫过氧化物酶试剂盒Dako-CytomationSA10-10
抗caspase-3兔多克隆抗体Lab VisionRB
生物素标记的二抗Lab Vision CorporationBA1001
显微镜Eclipse 80iNikon--
DS-Fi1数字显微镜相机Nikon--
Image J 1.47 v软件National Institutes of Health--

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
动物模型
小鼠品系、性别、体重、来源、饲养条件
阅读提示:Materials and methods, Animals section
药物处理
重铬酸钾剂量、给药途径、给药时间;F. indica剂量、给药途径、给药时间
阅读提示:Materials and methods, Experimental design section
生化检测
SOD、GST、GSH-Px检测方法;BUN、肌酐、IL-6检测试剂盒
阅读提示:Materials and methods, sections 2.5, 2.6, 2.7
组织学检查
固定方法、切片厚度、染色方法
阅读提示:Materials and methods, section 2.9
免疫组化
抗原修复方法、抗体、显色方法
阅读提示:Materials and methods, section 2.8