糖尿病视网膜病变中血清和泪液组织型纤溶酶原激活物及纤溶酶原激活物抑制剂-1水平的关系

Relationship between serum and tear levels of tissue plasminogen activator and plasminogen activator inhibitor-1 in diabetic retinopathy.

作者信息Nurbadriah Binti Jasmiad, Rohana Binti Abd Ghani, Renu Agarwal, Zaliha Binti Ismail, Azlindarita Aisyah Mohd Abdullah, Mohd Yusri Idorus
PMID36057550
发布时间2022-09-03
DOI10.1186/s12886-022-02550-4

实验完整度

横断面研究,包括患者样本收集、ELISA检测、统计分析,有明确分组和相关性分析,但缺乏功能验证和机制验证。

主要模型

2型糖尿病视网膜病变患者(n=26) 2型糖尿病无视网膜病变患者(n=29)

重点核对

患者分组:有DR(n=26)与无DR(n=29) 样本类型:泪液和血清 检测方法:ELISA(Human tPA ELISA Kit和Human PAI-1 ELISA Kit) 主要结果:血清PAI-1水平在有DR组显著升高(p<0.05)

摘要

背景:糖尿病视网膜病变(DR)是长期2型糖尿病(T2DM)的严重并发症,是全球失明和视力障碍的主要原因。本研究旨在比较有或无DR的T2DM患者泪液和血清中组织型纤溶酶原激活物(tPA)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的活性。方法:本研究纳入的T2DM患者中,26例有DR(n=26),29例无DR(n=29)。采集所有参与者的血液和泪液样本。在血清和泪液中测定PAI-1和tPA的水平。同时获取人体测量指标、HbA1c、肾功能和血脂谱。结果:与无DR的患者相比,有DR的患者病程显著更长,收缩压显著更高。有DR患者血清PAI-1水平显著高于无DR患者,分别为32.72(IQR 32.52)ng/mL vs 21.37(IQR 14.93)ng/mL(p<0.05)。然而,两组泪液PAI-1水平相当。两组血清和泪液tPA水平也相当(p>0.05)。在有DR的患者中,两种生物标志物的泪液和血清水平之间无显著相关性。无DR的患者显示血清和泪液tPA水平呈中度正相关,系数为0.363,但无统计学意义。有DR的患者泪液PAI-1水平与BMI呈显著正相关(r=0.555,p=0.026)。在无DR组中,血清PAI-1水平与尿白蛋白肌酐比值(UACR)呈统计学显著正相关(r=0.501,p=0.013)。结论:本研究表明,与无DR患者相比,有DR患者的血清PAI-1水平显著升高。未观察到泪液和血清PAI-1及tPA之间的显著相关性。因此,泪液生物标志物的作用仍有待进一步研究。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
糖尿病视网膜病变患者血清和泪液中tPA和PAI-1水平是否与无视网膜病变患者存在差异,以及这些生物标志物在泪液和血清之间是否存在相关性?
核心机制
文中未明确说明
主要证据
横断面研究显示,有DR患者的血清PAI-1水平显著高于无DR患者,但泪液PAI-1和tPA水平在两组间无显著差异,且泪液与血清水平无显著相关性。
研究意义
泪液中的PAI-1和tPA可能作为DR管理的潜在生物标志物,但需要更大规模的研究进一步验证。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

受试者招募与分组

比较有或无糖尿病视网膜病变的2型糖尿病患者

从内分泌门诊招募T2DM患者,通过眼底照相和ETDRS标准分为有DR组(n=26)和无DR组(n=29)。

2

样本收集与处理

获取血清和泪液样本用于生物标志物检测

采集晨起8-10点血样和泪液样本,泪液用Schirmer试纸收集,离心提取;血液离心分离血清,均储存于-80°C。

3

生化指标检测

测定血清和泪液中tPA和PAI-1水平及其他相关指标

使用ELISA试剂盒检测血清和泪液中tPA和PAI-1浓度,同时测定血糖、血脂、肾功能等指标。

4

统计分析

比较组间差异并分析相关性

使用SPSS 25.0进行统计分析,Mann-Whitney检验比较连续变量,Fisher精确检验比较分类变量,Spearman相关分析评估变量间关系。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

产品清单

实验环节名称品牌货号
Schirmer泪液试纸----
数字眼底照相机(CR-2 AF)Canon Inc--
人tPA ELISA试剂盒Elabscience BiotechE-EL-H2106
人PAI-1 ELISA试剂盒Elabscience BiotechE-EL-H2104
酶标仪(Victor™ X5)Perkin Elmer--
SPSS Windows 25.0版SPSS Inc.--

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
受试者纳入与分组
患者年龄≥18岁,T2DM病程≥5年,HbA1c≤12,eGFR>60 ml/min/1.73m2,排除标准(血压>160/90,1型糖尿病等),分组依据ETDRS标准
阅读提示:Material and methods 部分
样本收集
晨起8-10点采集血样和泪液,泪液用Schirmer试纸(闭眼5分钟),离心提取泪液(16000xg,4°C,5分钟),血清分离(1000xg,2-8°C,15分钟)
阅读提示:Material and methods 部分
生物标志物测定
ELISA试剂盒(Human tPA ELISA Kit E-EL-H2106 96T,Human PAI-1 ELISA Kit E-EL-H2104 96T),操作步骤(100μL样本,孵育90分钟等),450nm读取
阅读提示:Material and methods 部分
统计分析
组间比较用Mann-Whitney检验和Fisher精确检验,相关性用Spearman秩相关,显著性水平p<0.05
阅读提示:Statistical analysis 部分