合成的olean-28,13β-内酰胺通过靶向YTHDF1-GLS1轴诱导胰腺癌中ROS依赖的代谢危机和细胞死亡

背景：胰腺癌（PAAD）是一种严重的恶性肿瘤，5年生存率约为9%。齐墩果酸是一种众所周知的天然三萜类化合物，具有药理活性。我们之前合成了一系列齐墩果酸衍生物，并评估了olean-28,13β-内酰胺（B28）在前列腺癌中的肿瘤抑制活性。然而，其详细机制仍不清楚。方法：通过RTCA、集落形成实验和流式细胞术确认B28在PAAD中的抗肿瘤活性。利用GO和KEGG富集分析分析RNA测序获得的差异表达基因（DEGs）。通过海马分析仪评估B28对细胞生物能量学的影响。使用慢病毒包装的质粒敲低或过表达靶基因。根据制造商方案，使用相应的检测试剂盒测量线粒体膜电位、ROS和GSH/GSSG的变化。结果：我们在体外评估并确认了B28有前景的抗肿瘤活性。RNA-seq图谱表明B28处理的PAAD细胞中多个代谢途径被中断。接下来，我们证明B28诱导细胞生物能量学危机以抑制PAAD细胞生长并诱导细胞死亡。我们进一步验证了细胞周期阻滞、细胞生长抑制、细胞凋亡和细胞生物能量学破坏可通过ROS清除剂NAC功能性地挽救。机制上，我们发现B28给药抑制了谷氨酰胺代谢。此外，我们验证了GLS1的下调有助于B28诱导的ROS产生和生物能量学中断。进一步，我们阐明YTHDF1-GLS1轴是B28诱导PAAD细胞代谢危机和细胞死亡的潜在下游靶点。最后，我们还确认了B28在体内的抗肿瘤活性。结论：目前的研究表明B28破坏YTHDF1-GLS1轴以诱导ROS依赖的细胞生物能量学危机和细胞死亡，最终抑制PAAD细胞生长，表明这种合成的olean-28,13β-内酰胺可能是干预PAAD的有效药物。