叶酸通过抑制Hippo信号通路减轻高糖高脂诱导的H9C2细胞焦亡

糖尿病心肌病（DCM）是糖尿病患者死亡的主要原因。叶酸对糖尿病诱导的心肌细胞损伤具有保护作用。本研究旨在探讨叶酸对高糖高脂（HGF）条件下培养的心肌细胞和2型糖尿病（T2DM）小鼠的影响，并阐明其潜在机制。通过生物信息学分析，利用药物-基因相互作用数据库鉴定潜在药物。H9C2心肌细胞在含30 mM葡萄糖和500 nM棕榈酸的存在或不存在叶酸、YAP1抑制剂（维替泊芬）或YAP1 siRNA的条件下培养。使用特定试剂盒测量细胞活力和乳酸脱氢酶（LDH）释放。通过流式细胞术检测焦亡。通过ELISA测量上清液中IL-1β和IL-18的浓度。通过qRT-PCR检测NLRP3、ASC和caspase-1的mRNA水平，并通过Western blotting检测NLRP3、ASC、cleaved caspase-1（p10）、caspase-1、YAP1、p-YAP1、LATS1和p-LATS1的蛋白表达。C57BL/6小鼠喂食高脂饮食（HFD）并结合腹腔注射链脲佐菌素（STZ）建立T2DM模型，叶酸或PBS处理8周（口服灌胃），每4周测量血糖和体重，小鼠心脏组织用于检测焦亡和Hippo信号通路相关蛋白表达。我们在高脂饮食+链脲佐菌素小鼠的心脏组织中鉴定了427个差异表达基因，在30个最显著的DEGs中，叶酸被预测为最可能的治疗药物。叶酸通过降低Hippo通路的激活减轻了HGF诱导的体外和体内细胞损伤，表现为LDH释放减少、细胞活力增加，以及NLRP3、ASC、cleaved caspase-1、IL-1β、IL-18、p-YAP和p-LATS表达降低。维替泊芬或YAP1 siRNA通过逆转YAP1诱导的焦亡中和了叶酸的保护作用。叶酸通过下调Hippo信号通路减少NLRP3炎症小体介导的焦亡，从而有效减轻T2DM诱导的H9C2细胞和动物损伤。