桑白皮酚类化合物通过CD36改善油酸钠诱导的NRK-52e细胞上皮-间质转化和纤维化

肾脏中的脂质沉积可对肾脏造成严重损伤，晚期存在明显的上皮-间质转化（EMT）和纤维化。为了研究桑白皮酚类化合物对油酸钠诱导的肾小管上皮细胞（NRK-52e细胞）脂质沉积所致的EMT和纤维化的干预作用及机制，以及CD36在此过程中的作用，对200 μmol/L油酸钠诱导的NRK-52e细胞给予10 μmoL/L的moracin-P-2″-O-β-d-吡喃葡萄糖苷（Y-1）、moracin-P-3′-O-β-d-吡喃葡萄糖苷（Y-2）、moracin-P-3′-O-α-l-阿拉伯吡喃糖苷（Y-3）和moracin-P-3′-O-[β-吡喃葡萄糖基-(1→2)阿拉伯吡喃糖苷]（Y-4），用油红O染色检测脂质沉积。Western blot检测脂质沉积相关蛋白CD36、炎症相关蛋白（p-NF-κB-P65、NF-κB-P65、IL-1β）、氧化应激相关蛋白（NOX1、Nrf2、Keap1）、EMT相关蛋白（CD31、α-SMA）和纤维化相关蛋白（TGF-β、ZEB1、Snail1）。qRT-PCR检测炎症、EMT和纤维化相关基因mRNA水平。ELISA检测TNF-α水平，比色法检测SOD和MDA水平。流式细胞术测量ROS。高内涵成像分析系统观察EMT和纤维化相关蛋白。同时，实验沉默CD36，比较药物处理前后的差异，然后使用分子对接技术预测活性化合物与CD36的潜在结合位点。研究结果表明，油酸钠可诱导NRK-52e细胞发生脂质沉积、炎症、氧化应激和纤维化。Y-1和Y-2能显著改善油酸钠引起的损伤，且Y-2的改善效果更好，而Y-3和Y-4无明显变化。沉默CD36后，Y-1和Y-2的改善作用消失。分子对接技术表明Y-1和Y-2与CD36存在氢键作用，且与Y-1相比，Y-2所需的结合能更低。总之，桑白皮中的moracin-P-2″-O-β-d-吡喃葡萄糖苷和moracin-P-3′-O-β-d-吡喃葡萄糖苷通过CD36改善了油酸钠诱导的NRK-52e细胞脂质沉积、EMT和纤维化。