TNF-α抑制剂阿达木单抗减轻内毒素诱导的大鼠心脏损伤

TNF-alpha inhibitor adalimumab attenuates endotoxin induced cardiac damage in rats.

作者信息Selim Durmaz, Tünay Kurtoğlu, Emin Barbarus, Nükhet Eliyatkın, Mustafa Yılmaz
PMID32267288
发布时间2020-04-03
DOI10.1590/s0102-865020200020000002

实验完整度

包含体外实验(动物模型)及生化和组织学检测,但未进行功能验证(如超声心动图)或机制验证(如心肌基因表达)。

主要模型

Wistar大鼠 脂多糖诱导的大鼠心肌损伤模型

重点核对

脂多糖剂量:5 mg/kg,腹腔注射 阿达木单抗剂量:10 mg/kg/天,腹腔注射,连续两天 分组:C、Ada、Lps、Lps+Ada,每组7只 检测指标:血清Troponin I、CK-MB、TNF-α、IL-6及心肌组织学评分

摘要

目的:探讨阿达木单抗预处理对脂多糖介导的心肌损伤的影响。方法:将28只Wistar大鼠随机分为四组(每组7只)。对照组(C组)动物每天腹腔注射0.9%生理盐水一次,持续两天。阿达木单抗组(Ada组)以10 mg/kg/天的剂量腹腔注射阿达木单抗,持续两天。脂多糖组(Lps组)大鼠腹腔注射5 mg/kg脂多糖。脂多糖+阿达木单抗组(Lps+Ada组)大鼠在给予脂多糖前接受阿达木单抗治疗。最后一次注射后24小时处死动物,采集血样测定生化心脏损伤标志物以及TNF-α和白细胞介素-6(IL-6)的循环水平。取心脏进行组织学检查。结果:内毒素暴露导致Lps组血清心脏损伤标志物、血清细胞因子和组织学心肌损伤评分显著升高。与Lps组相比,Lps+Ada组的循环细胞因子水平、心脏损伤标志物以及心肌坏死、血管周围细胞浸润和炎症的组织学损伤评分显著降低(p<0.05)。结论:阿达木单抗预处理可减轻内毒素诱导的大鼠心肌损伤。这种有益作用被认为与细胞因子释放减少有关。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
阿达木单抗预处理对脂多糖介导的大鼠心肌损伤有何影响?
核心机制
阿达木单抗通过抑制TNF-α的活性,减少循环中TNF-α和IL-6的释放,从而减轻心肌损伤。
主要证据
在脂多糖诱导的大鼠模型中,阿达木单抗预处理显著降低了血清TNF-α、IL-6水平及心肌损伤标志物(Troponin I、CK-MB),并改善了心肌组织学损伤评分。
研究意义
研究结果表明阿达木单抗可能成为急性炎症性心脏损伤的预防或缓解策略,但需进一步研究确定其保护作用。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

建立内毒素诱导心肌损伤模型

通过脂多糖注射模拟内毒素血症诱发的心肌损伤。

将28只Wistar大鼠随机分为四组,其中Lps组和Lps+Ada组注射5 mg/kg脂多糖(腹腔),对照组和Ada组注射生理盐水或阿达木单抗作为对照。

2

评估心肌损伤生化标志物

检测血清中心肌损伤标志物水平以评估心肌损伤程度。

采集血样,通过化学发光微粒免疫分析法(CMIA)测定血清Troponin I和CK-MB水平。

3

评估循环细胞因子水平

检测血清TNF-α和IL-6水平以评估全身炎症反应。

使用大鼠特异性ELISA试剂盒测定血清TNF-α和IL-6浓度。

4

组织病理学评估

通过组织学评分评估心肌损伤的严重程度。

心脏组织经石蜡包埋、切片、HE染色,在光学显微镜下由盲法病理学家评估充血、炎症、坏死和血管周围细胞浸润,并采用4级半定量评分。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

产品清单

实验环节名称品牌货号
阿达木单抗Humira©, Vetter Pharma-Fertigung GmBH&Co.KG--
脂多糖Sigma--
Architect C8000Abbott--
ELISA试剂盒ElabscienceE-EL-R0019
光学显微镜Leica--

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
模型建立
大鼠品系:Wistar;体重:170-270g;分组:每组7只;脂多糖剂量:5 mg/kg(i.p);阿达木单抗剂量:10 mg/kg/天(i.p),连续两天
阅读提示:Methods: Study protocol
生化标志物检测
检测方法:CMIA;采血时间:末次注射后24小时;离心条件:1000g,10分钟
阅读提示:Methods: Biochemical analysis
细胞因子检测
ELISA试剂盒:E-EL-R0019;检测指标:TNF-α、IL-6
阅读提示:Methods: Biochemical analysis
组织病理学评估
切片厚度:4µm;染色:HE;评分系统:0-3分;评估指标:充血、炎症、坏死、血管周围细胞浸润
阅读提示:Methods: Histopathologic evaluation