桑黄酮抑制食管癌的综合分析：通过网络药理学、分子动力学模拟和体外验证

食管癌（EC）是一种以高发病率和死亡率为特征的恶性肿瘤，其复杂的发病机制需要制定有效的治疗策略。在本研究中，我们通过网络药理学、分子动力学（MD）模拟和体外实验，研究了桑黄酮（Morusin）对EC的抗癌作用及其潜在机制。转录组分析确定了3,540个差异表达基因作为EC的潜在治疗靶点，而使用SWISSprediction数据库预测了桑黄酮的潜在靶点。交集分析揭示了21个共同基因，这些可能代表桑黄酮在EC治疗中的关键靶点。使用STRING数据库构建了蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络，并在Cytoscape 3.8.0中进行分析，确定MAPK3、PTGS2和HSP90AA1为核心枢纽基因。GO富集分析表明，桑黄酮抗EC活性涉及的生物学过程主要包括肽基丝氨酸磷酸化、肽基丝氨酸修饰和衰老。细胞组分主要与黏着斑、细胞-基质连接和小窝相关，而分子功能富集在蛋白丝氨酸激酶活性、蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶活性、蛋白丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸激酶活性以及MAP激酶激酶活性。KEGG通路富集提示桑黄酮可能通过HIF-1信号通路、前列腺癌和血清素能突触通路发挥作用。分子对接和MD模拟表明桑黄酮与ERK1（MAPK3）和MEK1稳定结合。体外实验显示，10 µM桑黄酮显著抑制EC细胞（KYSE150和TE1）的增殖，而对正常食管上皮细胞（Het-1A）无明显细胞毒性。此外，Transwell和伤口愈合实验证实桑黄酮抑制EC细胞的迁移和侵袭。Western blot分析显示，桑黄酮处理降低了Bcl-2的表达，增加了cleaved-caspase3/caspase3、cleaved-PARP/PARP和Bax的水平，同时p-MEK1/2、p-MAPK3和p-ERK2显著下调。总之，这些发现表明桑黄酮通过抑制MAPK信号通路抑制EC细胞的增殖、迁移和侵袭，并诱导细胞凋亡。