乳脂球-EGF因子8/ATP结合盒亚家族E成员1轴维持线粒体自噬流稳态以抑制急性胰腺炎中的铁死亡

背景：急性胰腺炎（AP）是一种严重的炎症性疾病，其中线粒体功能障碍和铁死亡关键驱动腺泡细胞损伤。我们先前的研究表明外源性乳脂球-表皮生长因子8（MFG-E8）在AP中的保护作用。本研究旨在阐明内源性MFG-E8在AP期间减轻线粒体损伤和铁死亡的分子机制。方法：使用两种小鼠AP模型进行体内研究，而雨蛙素+脂多糖诱导的大鼠胰腺外分泌AR42J细胞中的线粒体自噬和铁死亡用于体外研究。利用Mfge8基因缺陷小鼠和慢病毒分别下调小鼠中MFG-E8的表达和过表达细胞中的MFG-E8。采用双重基因修饰在体外过表达MFG-E8并同时敲低三磷酸腺苷（ATP）结合盒亚家族E成员1（ABCE1）。在体外和体内实验中均使用了一种线粒体自噬激动剂和两种铁死亡抑制剂。结果：内源性MFG-E8的表达在实验性AP中下调。Mfge8基因缺失加重了线粒体超微结构损伤，损害了线粒体自噬流并加剧了铁死亡，表现为脂质过氧化增加、Fe2+积累和谷胱甘肽过氧化物酶耗竭。在AR42J腺泡细胞中慢病毒过表达MFG-E8恢复了线粒体自噬活性，保持了线粒体膜电位并减少了氧化应激。机制上，免疫共沉淀证实MFG-E8与ABCE1直接相互作用，ABCE1是关键的线粒体自噬调节因子。ABCE1敲低消除了MFG-E8对线粒体功能和铁死亡抑制的保护作用，表明MFG-E8/ABCE1轴对于维持线粒体自噬稳态至关重要。药理学恢复线粒体自噬或抑制铁死亡可挽救由MFG-E8/ABCE1失调引起的腺泡细胞损伤。在体内，铁死亡抑制显著改善了Mfge8缺陷AP小鼠的胰腺病理和生存。结论：内源性MFG-E8通过结合ABCE1维持线粒体自噬流并抑制铁死亡来保护AP。靶向该轴为减轻胰腺损伤提供了一种有前景的治疗策略。要点：-内源性MFG-E8在急性胰腺炎（AP）中下调，破坏了MFG-E8/ABCE1复合物的形成。-MFG-E8/ABCE1轴维持Parkin-PINK1介导的线粒体自噬以清除胰腺腺泡细胞中受损的线粒体。-该轴通过减少Fe2+积累和脂质过氧化抑制铁死亡，减轻AP相关的胰腺损伤。