Apelin-13 通过靶向 Keap1/Nrf2 信号通路减轻脑出血后的血脑屏障功能障碍

背景：血脑屏障（BBB）功能障碍是脑出血（ICH）后继发性脑损伤的关键驱动因素。既往研究表明，Apelin-13 在多种脑血管疾病中具有减轻 BBB 功能障碍的潜力。然而，Apelin-13 维持 BBB 完整性的确切机制仍不清楚。本研究探讨了 Apelin-13 是否通过靶向 Keap1/Nrf2 信号通路发挥神经保护作用。方法：采用胶原酶建立体内 ICH 模型，评估神经功能、脑水肿、紧密连接蛋白水平和伊文思蓝渗漏。体外，用血红素诱导 bEnd.3 单层细胞模拟 ICH 条件。为评估 Apelin-13 在 Keap1/Nrf2 信号通路中的作用，我们使用了靶向 Nrf2 和 apelin 受体（APJ）的特异性 shRNA。通过跨内皮电阻检测、蛋白质印迹和免疫荧光分析评估 Apelin-13 在血红素刺激的 bEnd.3 细胞中的神经保护作用。结果：Apelin-13 治疗显著减轻了 ICH 小鼠的脑损伤，减少了脑水肿，并促进了神经功能恢复。这些作用伴随着基质金属蛋白酶-9 表达的显著降低和紧密连接蛋白水平的增加。在血红素诱导的 bEnd.3 细胞中观察到类似的保护作用，Apelin-13 还促进了 Nrf2 表达并抑制了 Keap1 表达，提示 Keap1/Nrf2 信号通路的参与。重要的是，APJ 沉默阻断了 Apelin-13 对 Keap1/Nrf2 通路的作用。此外，Nrf2 敲低消除了 Apelin-13 的保护作用，逆转了其在血红素刺激的 bEnd.3 细胞中对凋亡的抑制、紧密连接完整性的维持和氧化应激的减轻。结论：总之，这些发现表明，通过与 APJ 结合，Apelin-13 激活内皮 Keap1/Nrf2 通路，以保护免受 ICH 诱导的 BBB 破坏并促进神经功能恢复，凸显了其对 ICH 的治疗前景。