RBM15通过调节TMC5的m6A修饰促进结肠腺癌进展

背景：结肠腺癌（COAD）是一种常见的消化系统恶性肿瘤，死亡率高，预后差。跨膜通道样蛋白5（TMC5）已被报道在多种癌症中发挥致癌作用。然而，TMC5在COAD中的作用和机制仍不清楚。方法：TIMER和UALCAN数据库分析了TMC5在COAD中的表达。使用Western blot检测TMC5、RNA结合基序蛋白15（RBM15）、E-钙粘蛋白、N-钙粘蛋白、波形蛋白、纤连蛋白和RAD51的蛋白水平。使用实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测TMC5、RBM15、铁蛋白重链1（FTH1）和胱氨酸/谷氨酸反向转运体SLC7A11（也称为xCT）的mRNA水平。使用5-乙炔基-2'-脱氧尿苷（EdU）、流式细胞术和Transwell实验评估细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭。使用商业试剂盒检测Caspase 3活性、ROS水平、Fe+水平和糖酵解水平。免疫荧光实验分析了53BP1和γH2AX焦点。使用异种移植肿瘤模型在体内检查TMC5对COAD肿瘤生长的影响。经SRAMP数据库分析后，使用甲基化RNA免疫沉淀（MeRIP）和双荧光素酶报告基因实验验证了RBM15与TMC5之间的相互作用。结果：TMC5和RBM15水平在COAD组织和细胞中显著升高。此外，TMC5沉默可抑制COAD细胞增殖、迁移、侵袭、EMT、糖酵解，并在体外诱导凋亡和铁死亡，以及在体内抑制肿瘤生长。在分子水平上，RBM15可通过调节m6A修饰来维持RNA稳定性和TMC5表达。结论：RBM15至少通过调节TMC5 mRNA的稳定性促进COAD细胞恶性行为，为COAD治疗提供了一个有力且有希望的靶点。