DPSCs通过PINK1/Parkin依赖性线粒体自噬调节滑膜巨噬细胞极化和胞葬作用

背景：滑膜炎是颞下颌关节骨关节炎（TMJOA）的关键因素，可能是该疾病的早期体征。值得注意的是，滑膜炎及其巨噬细胞成分是开发治疗干预的靶点。牙髓干细胞（DPSCs）来源于神经嵴，与颌面组织同源，因此在原位颌面再生医学中引起了极大的兴趣。然而，关于DPSCs在颞下颌关节（TMJ）滑膜巨噬细胞中作用的研究相对较少。目的：本研究旨在评估DPSCs对TMJOA大鼠模型滑膜炎的调节和修复能力，并阐明其对滑膜巨噬细胞的具体作用机制。方法：在体内，设立三组：对照组（无诱导且无治疗）、OA组（OA大鼠但未治疗）和DPSCs治疗组（OA大鼠接受DPSCs治疗）。通过关节内注射完全弗氏佐剂和碘乙酸钠诱导大鼠进行性TMJOA。2周后，将DPSCs注射入关节腔作为治疗干预。同时，向对照组和OA组大鼠关节内注射生理盐水。治疗4周后，进行组织学分析以评估滑膜炎的修复情况。此外，建立了由巨噬细胞和DPSCs组成的体外共培养体系。采用mRFP-GFP-LC3慢病毒转染、Mito-Tracker Red和Lyso-Tracker Green染色、透射电子显微镜和Western blot分析等技术对各组进行评估。此外，将凋亡的原代中性粒细胞与极化巨噬细胞共培养，以观察巨噬细胞在不同处理条件下对凋亡原代中性粒细胞的吞噬能力。结果：在大鼠模型中，与OA组相比，DPSCs组细胞浸润和胶原沉积减少，抗炎CD206水平升高，炎症性CD86水平降低，并在体内和体外增强巨噬细胞吞噬凋亡细胞的能力。值得注意的是，DPSCs在上调自噬体表达、促进与线粒体和溶酶体的共定位以及调节线粒体自噬蛋白表达方面表现出增强的功效。此外，抑制M1巨噬细胞中的线粒体自噬部分减弱了DPSCs诱导的M2极化效应和吞噬作用。结论：DPSCs通过增强巨噬细胞的M2极化和胞葬功能显著缓解TMJOA大鼠的滑膜炎。本研究强调了DPSCs通过调节线粒体自噬调节滑膜巨噬细胞功能，作为TMJOA治疗策略的潜力。