抑制ATG5介导的自噬维持PMAIP1稳定性以促进细胞凋亡并抑制三阴性乳腺癌进展

目的：三阴性乳腺癌（TNBC）是一种高度侵袭性的乳腺癌亚型，具有高复发率和缺乏有效靶向治疗的特点。本研究旨在探讨促凋亡因子佛波醇-12-十四酸酯-13-乙酸酯诱导蛋白1（PMAIP1）与自噬相关蛋白5（ATG5）之间的相互作用及其在TNBC细胞凋亡和自噬中的调控机制，为TNBC寻找潜在的治疗靶点。方法：从癌症基因组图谱中获取TNBC相关数据集，并通过PAM50分析筛选，以评估样本中PMAIP1的表达。此外，使用实时荧光定量聚合酶链反应检测TNBC细胞系（MDA-MB-231）中PMAIP1的表达。在MDA-MB-231细胞中，过表达或敲低PMAIP1和ATG5的表达，并使用氯喹（20 μM）抑制自噬。分别使用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot评估基因和蛋白表达水平。使用免疫荧光观察微管相关蛋白1轻链3斑点的形成以评估自噬水平。此外，使用TUNEL实验、集落形成实验和Transwell实验分析细胞凋亡、增殖、迁移和侵袭。结果：与对照组相比，TNBC组织和MDA-MB-231细胞中PMAIP1的表达显著升高。此外，过表达PMAIP1可显著增加MDA-MB-231细胞的凋亡水平，并显著降低自噬水平，而敲低PMAIP1则产生相反效果。另外，敲低ATG5表达或使用氯喹处理不仅导致PMAIP1表达随时间依赖性增加，而且降低了自噬水平并增强了细胞凋亡水平。此外，同时敲低PMAIP1和ATG5显著上调凋亡水平，同时下调自噬水平。而且，单独敲低PMAIP1促进了TNBC细胞的活力、侵袭和迁移能力，而双重敲低则逆转了这些效应。结论：抑制ATG5介导的自噬维持PMAIP1稳定性，从而促进细胞凋亡并抑制TNBC进展。