AMPK激活通过调节成年雄性小鼠炎症组织巨噬细胞中STAT3磷酸化减轻炎症性疼痛

炎症性疼痛是一个重大的临床挑战。AMP激活蛋白激酶（AMPK）被认为能够通过抑制核因子κB（NF-κB）和信号转导与转录激活因子（STAT）等转录因子来减轻炎症。我们先前的研究表明，AMPK通过抑制NF-κB活化和白细胞介素-1β（IL-1β）表达来减轻炎症性疼痛。然而，AMPK在炎症性疼痛中通过调节STAT3磷酸化来调节活性氧（ROS）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的作用仍未被充分理解。本研究旨在探讨AMPK在调节炎症组织巨噬细胞中STAT3磷酸化以减轻炎症性疼痛中的作用。通过将完全弗氏佐剂（CFA）皮下注射到成年雄性小鼠左后爪足底表面建立炎症性疼痛模型。行为学测试机械性异常性疼痛和热潜伏期以确定伤害性行为。免疫印迹定量p-AMPK和iNOS表达水平。通过蛋白质印迹和免疫荧光评估巨噬细胞中p-STAT3(Ser727)和STAT3的核转位。通过流式细胞术检测NR8383巨噬细胞中ROS积累和线粒体损伤。进行慢病毒感染细胞实验以转染编码STAT3 S727D突变体的载体。AMPK激活剂AICAR治疗减轻了CFA诱导的炎症性疼痛，增强了AMPK磷酸化，并降低了炎症皮肤组织中的iNOS表达。AICAR有效阻止STAT3核转位，同时促进细胞质中STAT3(Ser727)的磷酸化。对CFA刺激的NR8383巨噬细胞的体外研究表明，AICAR增加了STAT3(Ser727)磷酸化，抑制了iNOS表达，并减弱了ROS积累和线粒体损伤。此外，增强STAT3磷酸化的S727D突变复制了AICAR对CFA诱导的氧化应激和线粒体功能障碍的保护作用。我们的研究表明，AMPK激活通过抑制STAT3核转位下调iNOS表达，并促进细胞质STAT3(Ser727)磷酸化，从而减少ROS表达和线粒体功能障碍，进而减轻炎症性疼痛。这些发现强调了在炎症性疼痛管理中靶向AMPK和STAT3通路的治疗潜力。