丁酸钠在体外通过TGR5/β-arrestin2调节巨噬细胞极化

背景：巨噬细胞在溃疡性结肠炎（UC）的发病机制中发挥重要作用。我们将探讨丁酸钠（SB）对巨噬细胞功能的影响。方法：利用SwissTargetPrediction数据库和表面等离子体共振（SPR）鉴定了丁酸的靶标。采用限制性蛋白水解质谱（Lip-MS）进一步研究丁酸与其靶标的结合位点，并通过分子对接模拟其结合模式。在体外用脂多糖（LPS）建立巨噬细胞极化模型。在有或无SB的情况下检测Takeda G蛋白偶联受体5（TGR5）和β-arrestin2的表达及巨噬细胞极化标志物。结果：TGR5被确定为丁酸的靶标。此外，TGR5的氨基酸区域275-286和321-330（GPBAR1 [275-286]和GPBAR1 [321-330]）是丁酸的潜在结合区域。基于分子对接分析，丁酸与TGR5的ASP-284和TYR-287形成有效的氢键相互作用。在细胞实验中，LPS抑制TGR5、β-arrestin2、IL-10、ARG1和CD206的表达，并增加IL-1β、iNOS和CD86的表达，而SB逆转了LPS的作用。TGR5拮抗剂SBI-115和敲低β-arrestin2抑制了丁酸钠的作用。TGR5激动剂INT-777逆转了敲低β-arrestin2的抑制作用。结论：SB通过TGR5/β-arrestin2在RAW264.7细胞中抑制LPS诱导的M1样极化并促进M2样极化，且TGR5是SB的靶标。