GANT61通过上调溶酶体活性和降低BCL2表达克服HL-60/ADR细胞对ADR的耐药性

背景：耐药性仍然是急性髓系白血病（AML）成功治疗的重大障碍，常常导致治疗失败。我们先前的研究表明，Glioma-associated oncogene-1（GLI1）降低化疗敏感性并促进AML细胞增殖。GANT61是GLI1的抑制剂，成为AML治疗中有前景的候选药物。本研究旨在探讨GANT61与阿霉素（ADR）联合对AML细胞耐药性的影响，并阐明GANT61可能增强AML细胞对ADR敏感性的机制。方法：研究AML细胞系和AML原代细胞以评估GANT61的效果和机制。流式细胞术用于验证凋亡。Cell Counting Kit-8（CCK-8）和EDU+染色用于观察细胞活力和对不同药物的细胞毒性效应。通过RNA-Seq分析比较了有或无GANT61处理的HL-60/ADR细胞的转录组图谱。对差异表达基因（DEGs）进行京都基因与基因组百科全书（KEGG）分析和基因集富集分析（GSEA）以揭示GANT61在AML细胞中的潜在机制。通过Western blot和实时聚合酶链反应（RT-PCR）评估GLI1、BCL2、Bax蛋白和mRNA表达水平。结果：我们的研究发现GANT61与ADR联合协同抑制HL-60/ADR细胞增殖并增强凋亡，且不显著加重骨髓抑制。机制上，GSEA揭示GANT61处理细胞中与KEGG术语“Apoptosis”和“Lysosome”相关的基因集富集。同时，“Apoptosis”被鉴定为由溶酶体DEGs富集的第三大相关通路，BCL2表达与AML患者中这些溶酶体DEGs呈负相关。RT-PCR和Western blot分析显示，GANT61显著抑制AML细胞中BCL2表达。最后，我们证明venetoclax（一种BCL2抑制剂）与GANT61联合治疗可提高HL-60/ADR细胞对ADR的敏感性。结论：GANT61通过上调溶酶体活性和下调BCL2表达有效逆转HL-60/ADR细胞对ADR的耐药性，为AML耐药患者提供了一种毒性可接受的新治疗策略。