JDF通过抑制CSF-1/PI3K/AKT信号通路促进M2巨噬细胞凋亡并降低肝癌细胞的 epithelial-间质转化和迁移

背景：癌细胞与肿瘤微环境之间的相互作用在肝癌中至关重要。解毒颗粒方（JDF）已被证明可降低肝癌切除术后复发和转移的风险。研究JDF治疗作用的机制可以扩展其应用领域并开发新的治疗方法。方法：我们建立大鼠肝癌原位移植瘤模型，并记录了JDF辅助治疗对肝癌复发和转移的预后影响。分别采集肝脏和肺组织进行免疫荧光染色和H&E染色。此外，用PMA和IL-4孵育THP-1细胞以诱导其分化为M2巨噬细胞。使用慢病毒敲低CSF-1表达以确定CSF-1的功能。将肝癌细胞与条件培养基（CM）共培养或与巨噬细胞共培养。使用MTT法测定细胞活力。使用ELISA、Western blotting和qPCR检测CSF-1、CSF-1R、E-cadherin、N-cadherin、PI3K、AKT和cleaved caspase-3的水平。使用细胞划痕和Transwell实验评估细胞迁移能力。使用流式细胞术评估细胞凋亡。结果：JDF治疗降低了术后肝癌转移的风险以及肝癌组织中CD206/CD68细胞的浸润。在细胞实验中，JDF显示出抑制M2巨噬细胞活性和下调CSF-1及CSF-1R表达的作用。JDF处理组上清液中CSF-1的浓度也较低。此外，发现M2-CM可促进癌细胞迁移和上皮-间质转化（EMT）；然而，在JDF给药后这些作用被减弱。敲低M2巨噬细胞中内源性CSF-1导致癌细胞迁移和EMT受到类似抑制。此外，JDF处理抑制了PI3K/AKT通路的激活，从而促进M2巨噬细胞的凋亡。结论：JDF治疗降低了肝癌细胞的EMT和迁移能力，这可能归因于M2巨噬细胞浸润的抑制和CSF-1/PI3K/AKT信号通路的阻断。该机制可能对降低肝切除术后转移扩散的风险具有重要意义。