环状RNA circ-IQGAP1敲低通过靶向miR-671-5p/TCF4缓解白介素-1β诱导的骨关节炎进展

目的：探讨环状RNA IQ基序含有GTP酶激活蛋白1（circ-IQGAP1）在白细胞介素（IL）-1β诱导的骨关节炎（OA）模型中的功能，并探讨circ-IQGAP1是否可以通过调节microRNA-671-5p（miR-671-5p）和转录因子4（TCF4）来调节软骨细胞凋亡、炎症损伤和细胞外基质降解。方法：从32名OA患者或正常受试者中收集软骨组织。人软骨细胞CHON-001细胞用不同剂量的IL-1β处理24小时。CHON-001细胞转染circ-IQGAP1过表达载体、TCF4过表达载体、circ-IQGAP1的小干扰RNA（siRNA）、miR-671-5p模拟物、miR-671-5p抑制剂或相应的阴性对照。通过定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）或蛋白质印迹检测软骨组织或CHON-001细胞中circ-IQGAP1、miR-671-5p和TCF4的表达水平。通过3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物（MTT）检测细胞活力。通过流式细胞术检测细胞凋亡。通过酶联免疫吸附测定（ELISA）分析炎症损伤，检测炎症细胞因子（IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α [TNF-α]）的分泌水平。通过蛋白质印迹评估细胞外基质降解，检测聚集蛋白聚糖和基质金属蛋白酶13（MMP13）的表达。通过双荧光素酶报告基因和RNA免疫沉淀（RIP）分析miR-671-5p与circ-IQGAP1或TCF4的靶向关系。结果：与正常受试者相比，OA患者软骨组织中circ-IQGAP1表达升高（n = 32），并且在IL-1β处理后，CHON-001细胞中其表达呈剂量依赖性增加。在OA患者软骨组织中（n = 32）和IL-1β攻击的CHON-001细胞中，miR-671-5p表达降低。在OA患者中，miR-671-5p表达与circ-IQGAP1水平呈负相关。circ-IQGAP1沉默减轻了IL-1β引起的软骨细胞活力降低、凋亡促进、炎性细胞因子（IL-6、IL-8和TNF-α）分泌以及细胞外基质降解（聚集蛋白聚糖减少和MMP13增加）。circ-IQGAP1靶向并抑制miR-671-5p。miR-671-5p敲低减弱了circ-IQGAP1干扰对IL-1β引起的软骨细胞凋亡、炎症损伤和细胞外基质降解的影响。TCF4是miR-671-5p的靶标，在OA患者软骨组织中（n = 32）和IL-1β攻击的CHON-001细胞中TCF4表达增加。OA患者中TCF4表达与miR-671-5p表达呈负相关。miR-671-5p过表达通过降低TCF4表达减轻了IL-1β介导的软骨细胞凋亡、炎症损伤和细胞外基质降解。circ-IQGAP1沉默通过调节IL-1β攻击的CHON-001细胞中的miR-671-5p降低TCF4表达。结论：circ-IQGAP1敲低减轻了IL-1β引起的软骨细胞凋亡、炎症损伤和细胞外基质降解。circ-IQGAP1可以通过调节miR-671-5p/TCF4轴来调节IL-1β引起的软骨细胞损伤。circ-IQGAP1可能作为治疗OA的新靶点。