抗人成纤维细胞生长因子-21单克隆抗体的制备、表征及体外生物活性分析

人成纤维细胞生长因子21（hFGF-21）参与许多代谢过程，并且hFGF-21水平升高与许多代谢疾病相关。然而，hFGF-21在代谢系统中的作用尚未完全了解。人源化抗hFGF-21单克隆抗体（mAb）将为进一步研究hFGF-21在代谢系统及相关疾病中的作用提供一种新方法，可能揭示未来治疗这些疾病的靶点。本研究旨在制备抗hFGF-21单克隆抗体，并鉴定其特性和体外生物活性。本研究结果表明，制备的抗hFGF-21单克隆抗体（克隆2D8）具有良好的特异性，免疫球蛋白亚型为IgG2b，效价为1:1.024×10^6。使用荧光激活细胞分选筛选hFGF-21表位，揭示了抗hFGF-21单克隆抗体识别的特异性15个氨基酸序列（YQSEAHGLPLHLPGN）。使用葡萄糖摄取试验和测量3T3-L1脂肪细胞中葡萄糖转运蛋白1（GLUT1）信使RNA（mRNA）的表达来确定抗hFGF-21的体外生物活性。结果表明，hFGF-21依赖性葡萄糖摄取和GLUT1 mRNA表达与所测试的抗hFGF-21单克隆抗体水平的增加呈负相关，并且hFGF-21活性可以通过增加单克隆抗体的浓度而克服，表明该单克隆抗体在体外具有hFGF-21中和活性。