血清CD203c+细胞外囊泡作为琥珀酰明胶诱导的围术期超敏反应的新型诊断和预后生物标志物

背景：围术期超敏反应（HR）是一种IgE-FcεRI介导的超敏反应，伴有肥大细胞和嗜碱性粒细胞的脱颗粒和活化。多项研究致力于评估肥大细胞和嗜碱性粒细胞的脱颗粒和活化以诊断和预测药物诱导的HR的预后。然而，从人体来源中分离足够纯的肥大细胞和嗜碱性粒细胞以进行研究是具有挑战性的。能够评估体内肥大细胞和嗜碱性粒细胞活化的有效生物标志物可能具有较高的诊断和预后价值。在本研究中，我们调查了琥珀酰明胶诱导的HR患者血清中沉淀的EVs。方法：使用总外泌体分离试剂盒和超速离心分离细胞外囊泡（EVs），通过蛋白质印迹、透射电子显微镜和纳米颗粒跟踪分析进行表征。使用Basophil Isolation Kit II通过阴性选择从新鲜外周血中分离嗜碱性粒细胞。人肥大细胞系用IL4刺激。通过蛋白质印迹和流式细胞术评估与超敏反应相关的蛋白质表达水平。使用商业ELISA试剂盒检测组胺和类胰蛋白酶水平，通过qRT-PCR评估炎症介质的基因表达。使用受试者工作特征（ROC）曲线评估生物标志物预测HR的特异性和敏感性。结果：HR样本中EVs的浓度和CD63、FcεRI、CD203c和类胰蛋白酶的蛋白表达水平显著（p<0.05）增加。HR患者血清和嗜碱性粒细胞来源的EVs中肥大细胞/嗜碱性粒细胞特异性CD203c的表达水平显著增加，并且在IL4存在下，肥大细胞中CD203c+-EVs的产生显著增加，这与组胺、类胰蛋白酶和炎症介质呈正相关。此外，EVs浓度和CD203c表达的ROC曲线表明CD203c+-EVs对HR具有强大的诊断能力。结论：血清CD203c+-EVs可作为HR的新型诊断和预后生物标志物。