DNMT3A介导的SOX17表观遗传沉默促进创面愈合中内皮细胞迁移和成纤维细胞活化

背景 创面愈合，尤其是受损的慢性创面愈合，对现代医学构成了巨大的挑战。理解创面愈合的分子机制对于开发新的治疗策略至关重要。 方法 建立小鼠创面愈合模型，分析创面愈合过程中的组织病理学变化，并通过免疫荧光（IF）检测创面皮肤组织中SRY盒转录因子17（SOX17）、DNA甲基转移酶3α（DNMT3A）以及特异性成纤维细胞标志物S100钙结合蛋白A4（S100A4）的表达。使用5-乙炔基-2'-脱氧尿苷（EdU）和Transwell迁移实验评估细胞增殖和迁移。RT-qPCR和western blot用于检测RNA和蛋白表达。使用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测转化生长因子-β（TGF-β）的分泌。通过染色质免疫沉淀-qPCR（ChIP-qPCR）和DNA pull-down实验确认DNMT3A与SOX17启动子CpG岛的相互作用。通过焦磷酸测序检测启动子甲基化。 结果 SOX17和DNMT3A表达在创面愈合的不同阶段受到规律调控。SOX17敲低促进HUVEC迁移以及TGF-β的产生和释放。通过建立内皮细胞-成纤维细胞共培养模型，我们发现HUVEC中SOX17敲低激活了HFF-1成纤维细胞，这些细胞表达α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和I型胶原蛋白（COL1）。DNMT3A过表达降低SOX17 mRNA水平。ChIP-qPCR和DNA pull-down实验验证了DNMT3A与SOX17启动子区域CpG岛的相互作用。焦磷酸测序证实DNMT3A过表达增加了SOX17启动子的甲基化水平。 结论 DNMT3A介导的SOX17下调通过促进内皮细胞迁移和成纤维细胞活化来促进创面愈合。