microRNA-365通过靶向EFNA3调节髓核细胞凋亡和细胞外基质降解减轻椎间盘退变

本研究旨在探讨microRNA-365（miR‐365）在椎间盘退变（IDD）发生发展中的作用。分别用miR‐365模拟物和miR‐365抑制剂转染髓核（NP）细胞。同时，通过定量逆转录聚合酶链反应（qRT‐PCR）检测转染效率和miRNA的表达水平。同时，通过碘化丙啶（PI）-AnnexinV-异硫氰酸荧光素（FITC）凋亡检测试剂盒测量NP细胞凋亡。随后，进行免疫荧光（IF）染色以评估胶原II、聚集蛋白聚糖和基质金属蛋白酶13（MMP‐13）的表达。此外，使用生物信息学预测和荧光素酶报告基因实验揭示miR‐365的靶基因。最后，我们从大鼠中分离原代NP细胞，并在大鼠IDD模型中注射NP‐miR‐365。结果表明，miR‐365的过表达可有效抑制NP细胞凋亡和MMP‐13表达，并上调胶原II和聚集蛋白聚糖的表达。相反，抑制miR‐365增强了NP细胞凋亡并升高了MMP‐13表达，但降低了胶原II和聚集蛋白聚糖的表达。此外，进一步的数据表明，miR‐365通过靶向ephrin‐A3（EFNA3）介导NP细胞降解。此外，当EFNA3上调时，NP细胞中细胞凋亡和分解代谢标志物增加。更重要的是，体内数据支持miR‐365‐NP细胞注射改善了大鼠模型中的IDD。miR‐365可能通过靶向EFNA3调节NP细胞凋亡和ECM降解来减轻IDD的发展。因此，miR‐365可能通过EFNA3成为治疗IDD的有前景的途径。