微波烧结制备的氮化硅生物陶瓷具有优异的力学性能、体外细胞相容性和抗菌性能

Silicon Nitride Bioceramics Sintered by Microwave Exhibit Excellent Mechanical Properties, Cytocompatibility In Vitro, and Anti-Bacterial Properties.

作者信息Jiayu He, Yuandong Liu, Xiaofeng Zeng, Yan Tong, Run Liu, Kan Wang, Xiangdong Shangguan, Guanzhou Qiu, Coswald Stephen Sipaut
PMID37998121
发布时间2023-11-17
DOI10.3390/jfb14110552

实验完整度

包含材料制备、物理表征、体外细胞实验和抗菌实验,但缺乏体内实验和机制验证,实验层级相对简单。

主要模型

小鼠成骨样MC3T3-E1细胞 金黄色葡萄球菌ATCC 25923 大肠杆菌ATCC 25922

重点核对

微波烧结参数:2.45 GHz,1600°C,保温2 h,氮气保护1000 Pa 气压烧结参数:1690°C,1.8 MPa,升温速率2°C/min,保温3 h 烧结助剂:Al2O3、Y2O3、MgO总含量10%,比例2:5:3 细胞接种密度:3×10^4 cells/mL(细胞毒性)和4×10^4 cells/孔(粘附实验) 抗菌实验菌种和条件:S. aureus和E. coli,37°C培养24 h

摘要

氮化硅是一种具有巨大潜力的生物陶瓷,多项研究已证明其生物相容性和抗菌性能。本研究采用不同于常见生产方法的微波烧结技术制备了氮化硅。SEM和孔径分布分析揭示了微波烧结氮化硅的微观结构,具有明显的孔隙。力学性能分析表明,微波烧结可以提高氮化硅的力学性能。采用CCK-8法证明微波烧结氮化硅无细胞毒性,具有良好的细胞相容性。通过SEM和CLSM观察,发现微波烧结氮化硅上细胞具有良好的粘附和交联,细胞骨架形态良好。微波烧结氮化硅已被证明无细胞毒性。此外,测试了微波烧结氮化硅对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抗菌能力,证明其具有良好的抗菌能力,与常用工艺制备的氮化硅相似。与气压烧结技术制备的氮化硅相比,微波烧结氮化硅在力学性能、细胞相容性和抗菌性能方面表现优异。这表明其作为骨植入物替代材料的巨大潜力。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
微波烧结技术是否会改善氮化硅的力学性能、细胞相容性和抗菌性能,从而使其成为骨植入物的可行替代材料?
核心机制
微波烧结制备的氮化硅具有更小的孔径和更高的孔隙率,但力学性能反而提高,这可能是因为微波烧结导致晶粒细化或孔隙分布均匀,从而改善了力学性能。
主要证据
CCK-8实验显示微波烧结氮化硅无细胞毒性并促进细胞增殖;SEM和CLSM显示细胞良好粘附和铺展;抗菌实验显示对S. aureus和E. coli具有显著的抗菌活性。
研究意义
研究表明微波烧结氮化硅是一种很有前途的植入材料,未来需要进一步研究其成骨特性及对动物生理活动的影响,并结合体内和临床试验改进制备工艺。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

材料制备

制备微波烧结和气压烧结的氮化硅样品,用于性能比较。

以Al2O3、Y2O3和MgO为烧结助剂,通过球磨、干燥、过筛、等静压成型,分别在微波烧结和气压烧结条件下制备氮化硅样品,并加工成圆片。

2

材料表征

表征两种氮化硅的微观结构、孔隙率、物相、润湿性和粗糙度等物理性能。

使用SEM、MIP、XRD、接触角测试仪和三维激光显微镜等对样品进行表征。

3

力学性能测试

比较微波烧结和气压烧结氮化硅的力学性能。

通过密度测试、维氏硬度计和电子万能试验机测量密度、维氏硬度、弯曲强度、压缩强度和断裂韧性。

4

细胞毒性检测

评估微波烧结氮化硅的细胞毒性。

将MC3T3-E1细胞接种在材料上培养,使用CCK-8试剂盒检测细胞活性。

5

细胞粘附与形态观察

观察细胞在材料表面的粘附状态和细胞骨架形态。

细胞接种后,使用DAPI和Actin-Tracker Red-Rhodamine染色,CLSM观察,并用SEM观察细胞形态。

6

抗菌性能测定

评估微波烧结氮化硅对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抗菌能力。

采用菌落计数法,将菌液与材料共培养后洗脱、稀释、涂板计数。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

产品清单

实验环节名称品牌货号
氮化硅粉末Hengyang Kaixin Special Materials Technology Co., Ltd.--
氧化铝----
氧化钇----
氧化镁----
无水乙醇----
行星球磨机----
等静压机----
烧结炉----
扫描电子显微镜TESCANMIRA
压汞仪MicromeriticsAutopore
X射线衍射仪RIGAKUSmartlab
接触角测试仪Chengde DingshengJY-82C
三维激光显微成像系统KeyenceVK-150K
硬度测试仪----
MC3T3-E1细胞Procell Life Science&Technology Co., Ltd.--
α-MEM培养基----
胎牛血清----
青霉素/链霉素----
胰蛋白酶EDTAProcell Life Science&Technology Co., Ltd.--
24孔板Saining Biotechnology Co., Ltd.--
CCK-8试剂盒Elabscience--
酶标仪----
DAPIBeyotime Biotech--
肌动蛋白红色荧光染料Beyotime Biotech--
共聚焦激光扫描显微镜ZessiLSM800
LB肉汤----
大肠杆菌ATCC 25922----
LB琼脂培养基----

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
材料制备
烧结助剂比例、球磨时间、等静压压力、微波烧结参数(2.45 GHz,1600°C,保温2 h,氮气保护1000 Pa)、气压烧结参数(1690°C,1.8 MPa,升温速率2°C/min,保温3 h)
阅读提示:见2.1节
材料表征
SEM、MIP、XRD、接触角、粗糙度测试的具体条件
阅读提示:见2.2节
力学性能测试
维氏硬度载荷98.1 N,保持15 s;弯曲、压缩、断裂韧性测试方法
阅读提示:见2.2节
细胞实验
细胞系MC3T3-E1、培养条件(5% CO2, 37°C)、接种密度(3×10^4 cells/mL和4×10^4 cells/孔)、培养时间
阅读提示:见2.3节和2.4节
抗菌实验
菌种(S. aureus ATCC 25923、E. coli ATCC 25922)、培养温度37°C、共培养时间24 h、稀释和涂板方法
阅读提示:见2.5节